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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白表达pBBR1MCS与pUC19的多克隆位点
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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钾釉

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白表达pBBR1MCS与pUC19的多克隆位点 已有2人参与

pBBR1MCS系列质粒与pUC19质粒的多克隆位点都在lacZa上，这样把基因插入多克隆位点还能表达吗

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1楼 2017-07-14 16:23:25
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最好下载完整的载体序列（很简单，如果你没有，我可以发给你），用DNA分析软件（比如Snap Gene）分析一下，看看具体哪个酶是inframe的
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4楼2017-07-15 00:40:31
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钾釉

新虫 (初入文坛)
不会造成插入基因的移码突变吗？

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2楼2017-07-14 16:28:12
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、可以。

2、载体上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列。

这个编码区中插入了一个多克隆位点，但并没有破坏lacZ的阅读框架，不影响其正常功能。
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及时行乐，人生不留遗憾！
3楼2017-07-14 20:46:42
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