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钾釉

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白表达pBBR1MCS与pUC19的多克隆位点 已有2人参与

pBBR1MCS系列质粒与pUC19质粒的多克隆位点都在lacZa上,这样把基因插入多克隆位点还能表达吗

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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最好下载完整的载体序列(很简单,如果你没有,我可以发给你),用DNA分析软件(比如Snap Gene)分析一下,看看具体哪个酶是inframe的
4楼2017-07-15 00:40:31
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钾釉

新虫 (初入文坛)

不会造成插入基因的移码突变吗?

发自小木虫Android客户端
2楼2017-07-14 16:28:12
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、可以。

2、载体上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列。

这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ的阅读框架,不影响其正常功能。
及时行乐,人生不留遗憾!
3楼2017-07-14 20:46:42
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