应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 细菌扫描电镜制作的样品能不能用来测FTIR和XRD
231/1返回列表
查看: 2816  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

食指之

木虫 (著名写手)
已领完
细菌扫描电镜制作的样品能不能用来测FTIR和XRD
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫，下载小木虫客户端

如题，求助各位大神，我做的是细菌处理重金属，按以下步骤制备扫描电镜样品： 2.5%戊二醛固定 4 h→磷酸缓冲液洗涤 3 次→乙醇梯度脱水（分别为 30%、50%、70%、85%、90%乙醇各 1 次，100%乙醇 2 次，15 min/次）→
乙酸异戊酯置换乙醇 2 次（20 min/次），每一步完成后经 8000 r/min 离心 5 min。将样品分别在 20℃、40℃和80℃冷冻 12 h，于冷冻干燥仪中干燥 12 h，备用。
想知道这样处理后的样品还能不能继续做红外光谱和xrd，还是需要重新制备样品?

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2017-07-12 14:33:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

食指之

木虫 (著名写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 懒懒呢 at 2017-07-19 11:03:21
楼主 这个制作电镜标本的步骤是在哪里找到的？冲洗和乙醇脱水的具体步骤能否告知？谢谢！！

这方法是在这上面其他大神那里找的，梯度乙醇脱水就是用不同浓度乙醇依次脱水，每次15min左右，我加的乙醇量是初始菌液体积的一半，做出来的图的效果还不错，

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
18楼2017-07-21 09:48:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这个是TEM的程序，不是SEM吧。SEM的程序其实不需要这么复杂，原则就是处理时间约少约好，当然需要看你的样品特征，以前我是做地质微生物的，需要把微生物和无机矿物放一起固定，如果你用乙醇脱水，保证啥都看不见。最后只能用PBS洗涤完，乙酸乙酯脱水一次，直接风干，不能冷干，因为固定用的是2.5%戊二醛，固定时间其实需要很长的，我固定了24小时都不行，不够硬。最后看文献用了0.25的戊二醛预固定几个小时再用2.5的固，稍微好一点。固定后的样品由于细菌和界面结合力通常是氢键，乙醇脱水氢键很容易就断了，洗脱完菌也没有了，只能自然风干。效果很好！
赞一下(1人) 回复此楼
20楼2017-09-15 11:04:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

懒懒呢

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主 这个制作电镜标本的步骤是在哪里找到的？冲洗和乙醇脱水的具体步骤能否告知？谢谢！！
赞一下 回复此楼
17楼2017-07-19 11:03:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

用户名太难起

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主你好，请问你知道答案了吗，样品可以继续用吗
赞一下 回复此楼
19楼2017-09-15 09:45:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

食指之

木虫 (著名写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-09-15 11:04:09
你这个是TEM的程序，不是SEM吧。SEM的程序其实不需要这么复杂，原则就是处理时间约少约好，当然需要看你的样品特征，以前我是做地质微生物的，需要把微生物和无机矿物放一起固定，如果你用乙醇脱水，保证啥都看不见 ...

可能我这个偏向纯细菌，酒精脱水后效果还不错，但是细菌表面富集的重金属并不多，可能与您说的这个原因有关，我下次做实验注意一下，

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
21楼2017-09-15 15:00:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

食指之

木虫 (著名写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 用户名太难起 at 2017-09-15 09:45:54
楼主你好，请问你知道答案了吗，样品可以继续用吗

我感觉用是可以用，但是结果可能不是特别准确

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
22楼2017-09-15 15:02:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
21楼: Originally posted by 食指之 at 2017-09-15 15:00:42
可能我这个偏向纯细菌，酒精脱水后效果还不错，但是细菌表面富集的重金属并不多，可能与您说的这个原因有关，我下次做实验注意一下，
...

纯的话应该不影响，如果想看表面富集金属次生EPS，可以考虑用乙酸乙酯脱水，避免酒精，然后可以试试不用戊二醛，用多聚甲醛试试，不过固定时间长一些

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
23楼2017-09-15 19:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
xhy86682楼
2017-07-12 14:33   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
北京的春天3楼
2017-07-12 14:33   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
mjlsb4楼
2017-07-12 14:34   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
粘人二丫头5楼
2017-07-12 14:34   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
pandongzi6楼
2017-07-12 14:34   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
gh8310137楼
2017-07-12 14:34   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
cxy33118楼
2017-07-12 14:35   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
cjxhyh9楼
2017-07-12 14:35   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
天空控股10楼
2017-07-12 14:35   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
2013yefeng11楼
2017-07-12 14:36   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
努力跑小姐12楼
2017-07-12 14:36   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
saralook13楼
2017-07-12 14:37   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
蒹葭往事14楼
2017-07-12 14:38   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
心有所念15楼
2017-07-12 14:38   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
oneblock16楼
2017-07-12 14:38   回复  
食指之(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 食指之 的主题更新
231/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭