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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 无缝连接
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入梦依然

新虫 (初入文坛)

[求助] 无缝连接 已有2人参与

大家好我最近在用全式金的infusion做一个目的基因和植物表达载体121的连接，但每次菌液PCR都没有条带不知道怎么回事呢

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1楼 2017-07-11 21:14:10
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试试Gibson吧，另外我都是把质粒提出来酶切验证
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2楼2017-07-12 01:51:16
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入梦依然

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-07-12 01:51:16
试试Gibson吧，另外我都是把质粒提出来酶切验证

谢谢你的回复，我提质粒后有条带，但酶切鉴定失败了，不知道算连上了吗？还有为什么质粒能p出来条带？

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3楼2017-07-12 10:27:17
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入梦依然

新虫 (初入文坛)
gibson是连接酶吗

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4楼2017-07-12 10:28:37
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PattyGao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶切鉴定没有条带，说明没有连接上啊
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5楼2017-07-12 13:18:56
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zhouxfd

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 入梦依然 at 2017-07-12 10:28:37
gibson是连接酶吗

你在Google上搜一下gibson assembly就明白了

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6楼2017-07-12 13:31:17
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王查查23

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
7楼2017-07-12 13:55:08
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王查查23

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2017-07-12 13:56:21
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梦之家

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 王查查23 at 2017-07-12 13:56:21
我昨天刚刚用了无缝克隆方法，长了5个菌，3个阳性

请问你做无缝克隆连接的片段大吗？用的是什么公司的试剂盒？
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9楼2018-03-21 21:04:50
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