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cchenyao

木虫 (正式写手)

[求助] TMB+H2O2 反应动力学问题 已有3人参与

TMB+H2O2+纳米酶,测反应动力学曲线时,测的是652nm处的吸收值,清零时用的是不加TMB的体系,理论来讲得到的时间与吸收值的曲线应该是随时间下降的曲线,但我得到的曲线是一直上升的,哪里错了?
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SXSYW1992

金虫 (小有名气)

652不是TMB吸收峰吗?不加TMB怎么还能测出吸收值呀?为什么吸收值会下降啊,不应该是随时间增加,然后达到某个饱和值然后不怎么变了吗?

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2楼2017-07-18 11:31:28
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SXSYW1992

金虫 (小有名气)

我之前也做过仿酶催化TMB实验,不知道是不是类似,我当时也是测652的吸光度。另外,我想请教怎么由时间-吸光度曲线转换成时间-动力学曲线呀?当时没搞明白,心里一直很不舒服,求解疑,谢谢~

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3楼2017-07-18 11:36:26
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大球丢

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by SXSYW1992 at 2017-07-18 11:36:26
我之前也做过仿酶催化TMB实验,不知道是不是类似,我当时也是测652的吸光度。另外,我想请教怎么由时间-吸光度曲线转换成时间-动力学曲线呀?当时没搞明白,心里一直很不舒服,求解疑,谢谢~
...

将吸光度根据摩尔吸光系数转换为产物浓度,做时间-产物浓度的关系图,做出来跟时间-吸光度图差不多,所以也可以不转换;而时间-吸光度曲线直线部分的斜率即是反应初速度,以反应初速度为y轴,底物初始浓度为x轴,做图,得到类似米氏曲线,即是反应动力学曲线
4楼2017-11-03 21:14:00
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呜呜拥有你

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主你好,我现在做ABTS的动力学,想像您参考一下经验,能不能留个联系方式,想请教一下
5楼2019-04-15 16:35:54
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不等式,

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by SXSYW1992 at 2017-07-18 11:36:26
我之前也做过仿酶催化TMB实验,不知道是不是类似,我当时也是测652的吸光度。另外,我想请教怎么由时间-吸光度曲线转换成时间-动力学曲线呀?当时没搞明白,心里一直很不舒服,求解疑,谢谢~
...

你好,我想请教一下测时间,吸光度曲线是先反应一段时间,再去测每分钟的吸光度,还是制备好样后直接去测每分钟的吸光度

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6楼2022-07-28 20:15:05
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不等式,

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 大球丢 at 2017-11-03 21:14:00
将吸光度根据摩尔吸光系数转换为产物浓度,做时间-产物浓度的关系图,做出来跟时间-吸光度图差不多,所以也可以不转换;而时间-吸光度曲线直线部分的斜率即是反应初速度,以反应初速度为y轴,底物初始浓度为x轴,做 ...

你好,我想请教一下测时间,吸光度曲线是先反应一段时间,再去测每分钟的吸光度,还是制备好样后直接去测每分钟的吸光度

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7楼2022-07-28 20:15:39
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RyanRuan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 不等式, at 2022-07-28 20:15:39
你好,我想请教一下测时间,吸光度曲线是先反应一段时间,再去测每分钟的吸光度,还是制备好样后直接去测每分钟的吸光度
...

您好,我想请教一下您最后学会了吗?感觉我做完的画完图是线性的
8楼2022-10-12 13:57:08
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yummy4

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by RyanRuan at 2022-10-12 13:57:08
您好,我想请教一下您最后学会了吗?感觉我做完的画完图是线性的...

您好,请问您问题解决了吗?我也有这个问题,您怎么保证能够每分钟一个样的?
9楼2023-03-01 16:51:52
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