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毕赤酵母表达外源蛋白酶,分子量为什么变低了?
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表达载体:pPICZaA,表达丝氨酸蛋白酶,理论大小28kDa,刚开始诱导表达过几次分子条带正确。但是,后续接着活化之前保存的菌进行诱导,经SDS-PAGE检测发现,酶分子量大小与理论值差异在4-5kDa左右。另:用E.coli表达,与理论值相符合。现在猜想是不是酵母菌传代次数太多而导致酶的表达受到影响而导致分子量降低,或者是在表达过程中酶被降解使得分子量偏低。 请各位虫友们指点迷津。 |
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