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Crazy钢

木虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1763.5
散金: 102
红花: 1
帖子: 118
在线: 74.8小时
虫号: 2562550
注册: 2013-07-24
性别: GG
专业: 畜牧学与草地科学

[求助] 如何确定有害菌或益生菌在肠道粘膜中主要和哪种细胞接触而引起或抑制炎症？已有1人参与

最近在做益生菌对炎症动物模型肠道的免疫调控作用机制。我看文献，别人做体外细胞试验的细胞模型有用肠上皮细胞、巨噬细胞或者树突细胞的，我想设计个试验验证下益生菌定植在肠道粘膜上主要和哪类细胞接触并发挥调节免疫功能的。由于之前没接触过这方面的，我想请教下，有什么方法可以验证呢？益生菌可以构建重组表达绿色荧光蛋白，免疫细胞可以切片染色，但是二者之间可以联系起来吗？望不吝赐教！谢谢！

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当骄阳渐渐远去，昏夜降临；当霓虹点点闪起，半月高悬；我拿什么证明我在这个城市的存在。

1楼 2017-07-06 20:04:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

音四1990

铁虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 221.1
帖子: 63
在线: 13.9小时
虫号: 2844397
注册: 2013-12-03
性别: MM
专业: 兽医免疫学

【答案】应助回帖

实验设计服用益生菌的实验组PB和不服用的对照NC，然后分别看肠道粘膜免疫细胞
1-免疫组化：直观观察免疫细胞分布，数量
2-免疫因子：免疫细胞会分泌特定免疫因子，通过ELISA/WB/real time Q PCR检测免疫因子水平，如IL，TNF，INF，TGF等
3-基因表达：免疫细胞上有特定的CD，比如促炎症/抑制炎症的T细胞可以检测CD4/CD8来区分，B细胞同理，通过检测细胞上的基因/蛋白来间接确认免疫细胞，可以通过FISH原位杂交，或者简单的荧光定量；

以上是我自己查到的内容，仅供参考

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我没那种命啊轮也不会轮到我

2楼2018-06-01 11:19:34