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开心的鱼儿

新虫 (初入文坛)

[求助] 启动子 已有2人参与

在做启动子的克隆,求助各位朋友研究启动子至少要克隆多少bp

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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、启动子是基因的重要组成部分,它的主要功能是控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度。启动子就像“开关”,决定基因的活动。但启动子本身并不控制基因活动,而是通过与转录因子结合而控制基因活动。

2、启动子长度的具有不确定性。一般情况下是1000bp(最少也要有800bp),很多学者都是克隆1500bp,甚至2000bp,3000bp的。

3、查到sequence viewer后,选取该基因5‘UTR上游1000bp的序列作为你的目的序列,然后与你的基因的已知序列(我想,在克隆启动子之前,你应该至少已经有你的目的基因的CDS了吧?)ATG下游序列进行拼接,然后利用你查到的序列设计F引物,利用你已知的目的基因序列设计R引物,再按照常规PCR进行后续试验即可!
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-06 15:53:43
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开心的鱼儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-06 15:53:43
1、启动子是基因的重要组成部分,它的主要功能是控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度。启动子就像“开关”,决定基因的活动。但启动子本身并不控制基因活动,而是通过与转录因子结合而控制基因活动。

2、 ...

非常感谢您

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3楼2017-07-25 08:59:39
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Agonilb

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-06 15:53:43
1、启动子是基因的重要组成部分,它的主要功能是控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度。启动子就像“开关”,决定基因的活动。但启动子本身并不控制基因活动,而是通过与转录因子结合而控制基因活动。

2、 ...

您好,我在做植物的启动子,用的是takara公司的盒子,设计了三组巢式引物,每次扩到第三次巢式的时候就没有条带了,第二次的时候是800左右,不知您是否可以指点一下,谢谢您
4楼2018-07-27 14:23:33
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HalaRoller

铁虫 (初入文坛)

我克了1700 从预测结果来看,越到后面作用原件越少

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5楼2018-08-03 14:14:38
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