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在做启动子的克隆,求助各位朋友研究启动子至少要克隆多少bp 发自小木虫Android客户端 |
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晋鹏
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【答案】应助回帖
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1、启动子是基因的重要组成部分,它的主要功能是控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度。启动子就像“开关”,决定基因的活动。但启动子本身并不控制基因活动,而是通过与转录因子结合而控制基因活动。 2、启动子长度的具有不确定性。一般情况下是1000bp(最少也要有800bp),很多学者都是克隆1500bp,甚至2000bp,3000bp的。 3、查到sequence viewer后,选取该基因5‘UTR上游1000bp的序列作为你的目的序列,然后与你的基因的已知序列(我想,在克隆启动子之前,你应该至少已经有你的目的基因的CDS了吧?)ATG下游序列进行拼接,然后利用你查到的序列设计F引物,利用你已知的目的基因序列设计R引物,再按照常规PCR进行后续试验即可! |

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