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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何提取链霉菌基因组
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)

[交流] 如何提取链霉菌基因组 已有2人参与

提了一个月了，还没提出来。求大神指导啊！

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1楼 2017-07-06 11:38:37
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by Limbo11 at 2017-07-06 17:02:00
多少都能提出来的吧，是不是破壁没破开

我用的CTAB法，先用溶菌酶溶了两到三个小时，再加入10%的SDS30分钟，再加入CTAB抽提液65℃50分钟，再加入酚氯仿异戊醇25:24:1，离心取上清，加入异丙醇，放在－20冰箱，一段时间后，离心倒上清，用水溶解沉淀。

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3楼2017-07-06 18:18:56
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by dgm1208 at 2017-07-06 21:32:09
你是大提吗？

小提

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6楼2017-07-06 21:48:01
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dgm1208 at 2017-07-06 21:32:37
小提用试剂盒就挺好的

还得花钱。。。。。老板让尽量能不花钱就不花钱

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7楼2017-07-06 21:48:42
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by dgm1208 at 2017-07-06 22:02:03
我大提的时间手动提的：加溶菌酶37度1h 酶可以多加点 加入10%的sds至终浓度2% 65度水浴10min 冷却至室温 加蛋白酶k 37度1h 加5M的NaClO4至终浓度1M 加苯酚氯仿异戊醇抽提3-4次 至界面无明显白膜为止 加Rna酶 37度1h ...

大神，可以私聊吗？还有几个地方请教你

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10楼2017-07-06 22:09:22
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by dgm1208 at 2017-07-06 21:51:02
你提完dna后面要做什么呢？

离心重组，表达蛋白，纯化，研究蛋白性质

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11楼2017-07-06 22:10:00
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