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alivingwtf捐助贵宾 (正式写手)
Nemo
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[交流]
多肽类药物在液相上的分离度和拖尾因子
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各位朋友、老师好，我现在做种多肽类药物分离纯化分析这块儿工作。 想请教一下大家：我现在用的HPLC洗脱方法走出来的图谱，主峰在8min出来，但是分离度总是0.95左右，摸索过了四种洗脱方法，主峰洗脱出来的时间从8min到20多min都试过了，但是分离度最大不超过1.0X。而且拖尾因子也比较大2.2X左右。我用的样品的纯度已经达到了99.4%左右，紧挨着主峰的附近有两个含量很小的杂质峰，但是分离度根本达不到药典规定的分离度>1.5的要求，想请教一下大家几个问题： 1、想增加分离度需要改进那些地方？我用的是水-乙腈再加上TFA作为流动相走梯度洗脱样品的； 2、因为药典上是对化药规定的分离度要大于1.5，对于多肽类药物的话这个适用么？ 3、如果想提高分离度，减小拖尾因子需要采取哪些方法？ 4、有对多肽、蛋白类药物的HPLC检测的一些参数（例如分离度、拖尾因子、纯度角、纯度阈值）等研究的文献么？我百度查到的都是对蛋白分离纯化大范围的概述，没有比较细的研究。 希望能得到大家的指导，谢谢！  |
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2楼2017-07-05 13:42:43
sdzll
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3楼2017-07-05 16:47:22
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alivingwtf: 金币+2, 现在用的有机流动相就是90%的ACN，难道说再降低一些么？那样的话主峰保留时间会不会太长了？ 2017-07-05 20:22:38
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵alivingwtf: 金币+2, 现在用的有机流动相就是90%的ACN，难道说再降低一些么？那样的话主峰保留时间会不会太长了？ 2017-07-05 20:22:38
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可以尝试降低有机相的浓度，比如降低到90%ACN，流动相体系是否充分考察。 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2017-07-05 18:52:06
5楼2017-07-06 14:05:49
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6楼2017-07-06 16:20:21
7楼2017-07-06 16:25:18
8楼2017-07-14 09:47:40