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多糖提取 已有2人参与
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多糖提取加了1ml苯酚和5ml浓硫酸之后，颜色变得很深，，这是为什么啊，浓硫酸没有和苯酚发应好？， 发自小木虫Android客户端 |
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晋鹏
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【答案】应助回帖
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1、你的实验现象“多糖提取液加了1ml苯酚和5ml浓硫酸之后，颜色变得很深”，这说明多糖提取液中糖含量很高。 2、可能你并没有做标准曲线，随着标准曲线中标品含量增加，颜色逐步加深。并不是你所说的浓硫酸没有和苯酚发应好！ 3、苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。 4、实验步骤 1．标准曲线的制作： 取20mL刻度试管11支,从0－10分别编号,按表27－1加入溶液和水,然后按顺序向试管内加入1mL 9％苯酚溶液,摇匀,再从管液正面以 5－20s.加入5 mL浓硫酸,摇匀.比色液总体积为8 mL,在恒温下放置30min.显色.然后以空白为参比,在485nm波长下比色测定,以糖含量为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线,求出标准直线方程. 2．可溶性糖的提取 取新鲜植物叶片,擦净表面污物,剪碎混匀,称取0.10－0.30g,共3份,分别放入3支刻度试管中,加入5-10mL 蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min（提取2次）,提取液过滤入25mL容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度. 3．测定吸取0.5mL样品液于试管中（重复2次）,加蒸馏水1.5mL,同制作标准曲线的步骤,按顺序分别加入苯酚、浓硫酸溶液,显色并测定光密度.由标准线性方程求出糖的量,按下式计算测试样品中糖含量. 式中：C一标准方程求得糖量（ug） α一吸取样品液体积（mL） V－提取液量（mL） n一稀释倍数 W一组织重量（g） 可溶性糖含量（％）＝从标准曲线查得糖的量（μg）×提取液体积（ml）×稀释倍数/[测定用样品液的体积(ml)×样品重量(g)×106]×100 |
2楼2017-07-05 20:11:00
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3楼2017-11-14 16:09:59
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4楼2017-11-14 16:10:37
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5楼2017-11-14 16:32:12
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