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luruixia

新虫 (正式写手)

[交流] 求教:HPLC基线漂移

HPLC条件如下:
A相:5mM磷酸-水   B相:5mM磷酸-85%甲醇-水
梯度:0min 30%B \ 15min 100%B\18min 30%B\20min 30%B
检测波长:210nm
常规C18反相分析柱
走空白梯度基线总是向上漂移,请教:基线漂移的因素有哪些?另外大家能否给我推jian一个走梯度基线稳定的甲醇-水体系流动相,谢谢!
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radishs

新虫 (小有名气)


jsys(金币+1):谢谢应助! 1-21 08:39
210nm用梯度的甲醇水基线飘正常。
2楼2009-01-20 21:41:01
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wwweeerrr

捐助贵宾 (著名写手)

★ ★
jsys(金币+2):谢谢应助! 1-21 08:39
2楼说的没错。
有时,空白样品的漂移是正常、允许的。
要想不漂移,一是改变波长比如为220nm,这个对结果影响可能不大,除非标准规定必须是210nm;二是将梯度洗脱变为等梯度,不过这个方法可能还要同时改变柱子,但对于大量样品的分析是有利的。因为梯度洗脱,平衡是非常花费时间的。
3楼2009-01-21 08:22:53
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jixf_1114

金虫 (正式写手)


jsys(金币+1):谢谢应助! 1-21 08:40
210nm时就要想用甲醇了,背景吸收很厉害了,试试乙腈吧
4楼2009-01-21 08:36:49
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……


wingcat(金币+1):谢谢 1-21 21:49
对,你走梯度,检测波长又是210,基线漂移很正常的
人生若只如初见...
5楼2009-01-21 11:28:50
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odyssey_xfl


jsys(金币+1,VIP+0):感谢参与!有道理啊! 2-4 16:26
这么复杂的体系,能不能换各简单点的!220nm以下最好用乙腈,而且,走梯度基线漂移很正常,低波长下情况更严重些!
6楼2009-02-04 16:14:07
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uliya809

木虫 (正式写手)


caidelingkitty(金币+1,VIP+0):感谢应助! 2-6 21:52
首先要改变波长,在210nm下甲醇是有吸收的,另外你的梯度可能需要改下,不过即使改了也不会很平。
7楼2009-02-05 08:19:14
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