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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 求教：HPLC基线漂移
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luruixia

新虫 (正式写手)

[交流] 求教：HPLC基线漂移

HPLC条件如下：
A相：5mM磷酸－水   B相：5mM磷酸－85％甲醇－水
梯度：0min 30%B \ 15min 100%B\18min 30%B\20min 30%B
检测波长：210nm
常规C18反相分析柱
走空白梯度基线总是向上漂移，请教：基线漂移的因素有哪些？另外大家能否给我推jian一个走梯度基线稳定的甲醇－水体系流动相，谢谢！
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1楼 2009-01-20 19:23:52
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radishs

新虫 (小有名气)
★
jsys(金币+1):谢谢应助！ 1-21 08:39
210nm用梯度的甲醇水基线飘正常。
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2楼2009-01-20 21:41:01
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wwweeerrr

捐助贵宾 (著名写手)
★ ★
jsys(金币+2):谢谢应助！ 1-21 08:39
2楼说的没错。
有时，空白样品的漂移是正常、允许的。
要想不漂移，一是改变波长比如为220nm，这个对结果影响可能不大，除非标准规定必须是210nm；二是将梯度洗脱变为等梯度，不过这个方法可能还要同时改变柱子，但对于大量样品的分析是有利的。因为梯度洗脱，平衡是非常花费时间的。
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3楼2009-01-21 08:22:53
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jixf_1114

金虫 (正式写手)
★
jsys(金币+1):谢谢应助！ 1-21 08:40
210nm时就要想用甲醇了，背景吸收很厉害了，试试乙腈吧
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4楼2009-01-21 08:36:49
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……
★
wingcat(金币+1):谢谢 1-21 21:49
对，你走梯度，检测波长又是210，基线漂移很正常的
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人生若只如初见...
5楼2009-01-21 11:28:50
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odyssey_xfl

★
jsys(金币+1,VIP+0):感谢参与！有道理啊！ 2-4 16:26
这么复杂的体系，能不能换各简单点的！220nm以下最好用乙腈，而且，走梯度基线漂移很正常，低波长下情况更严重些！
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6楼2009-02-04 16:14:07
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uliya809

木虫 (正式写手)
★
caidelingkitty(金币+1,VIP+0):感谢应助！ 2-6 21:52
首先要改变波长，在210nm下甲醇是有吸收的，另外你的梯度可能需要改下，不过即使改了也不会很平。
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7楼2009-02-05 08:19:14
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