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PCR扩增结果出现逐级叠加累积，做成单克隆依然如此！是何原因？
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请大神赐教！ 最近做PCR，拿的动物肌肉的全基因组进行扩增，出现了逐级递增的PCR条带， ![\"PCR扩增结果出现逐级叠加累积，做成单克隆依然如此！是何原因？\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2017/0629/w153h2992917_1498721033_707.png#opennewwindow\") DFSZ为四种不同的物种，最后用FF的红框中的条带（约500bp左右）割胶回收，再做成单克隆，拿通用引物M13扩增，结果 ![\"PCR扩增结果出现逐级叠加累积，做成单克隆依然如此！是何原因？-1\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2017/0629/w100h2992917_1498721210_404.png#opennewwindow\") 仍然出现逐级递增的条带。其中单克隆3没有多条带，最后送样测序的是单克隆的3和6。测序结果显示除去质粒部分基因，单克隆3含有170左右碱基，而单克隆6测序也能测通（且不含杂峰），含有400左右碱基，有趣的是单克隆6的序列中是含有两个3的序列。 也即再最初的全基因组PCR中推测的自身片段可以累加逐级递增。但单克隆也出现这种结果，该怎么解释？这段基因是能够形成什么特殊的结构才会导致如此吗？ 大神赐教！ |
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2017-06-29 15:49
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明若兮5楼
2017-06-29 15:54
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xhmaohan7楼
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phshcd7612楼
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