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懒惰的小猴子

新虫 (正式写手)

[求助] P不出条带来,求帮忙分析下

设计了5个引物,分别做了根和叶的pcr实验,我的模板是反转录CDNA,加0.6微升,引物各0.6微升,Taq酶10微升,目的片段是一百多到两百多bp。电泳结果如图。左侧5个泳道是叶,右侧5个泳道是根。图一感觉有拖尾,而且条带不是很亮。图二是第二次pcr,前四个引物每个引物的退火温度都提高了0.5度,最后一个引物提高了1度,反而出现了好多条条带。而且叶的电泳条带两次电泳都不亮,是引物的问题吗?这种情况我该怎么改进?求帮忙分析一下

P不出条带来,求帮忙分析下
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P不出条带来,求帮忙分析下-1
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懒惰的小猴子

新虫 (正式写手)

第1泳道和第6泳道是内参基因
2楼2017-06-29 09:56:35
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伤何处

木虫 (正式写手)

taq?10ul?
对也罢,错也罢;正也罢,逆也罢;通途也好,崎岖无妨……但问,吾心坚否?若坚,纵使歧路,以铁心,贯穿而过,亦为大道!不坚,便是坦途,也难登临绝顶,观险峰
3楼2017-06-29 10:07:37
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王查查23

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2017-06-29 21:08:13
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Angle_Hebe

木虫 (正式写手)

5楼2017-06-29 23:51:27
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lvgaoqiang

新虫 (小有名气)

200片段和引物而具体能区分开吗,目的片段太小,

发自小木虫IOS客户端
6楼2017-10-11 15:40:23
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潇衍77

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-16 07:46:47
引响pcr的有很多因素,模板质量,引物浓度,退火温度等都会有一定的影响。你具体要解决的是条带淡的问题还是什么问题呢?

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7楼2017-10-16 00:11:19
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圣地大学

新虫 (小有名气)

我也p基因遇到了问题,我是p不出来,什么都没有!模板换了几个!还是p不出来

发自小木虫Android客户端
8楼2017-10-16 22:40:29
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