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克隆死活做不出来，求助大神 已有5人参与
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总共要构建三个质粒，因为片段较多，整个载体大概14k的样子，先后尝试了五个片段的Gibson以及酵母组装，其中有一个质粒（大概11k）通过Gibson的方法得到了，其他的两个用Gibson要么不长，要么就是验证错的，用酵母组装的方式，在酵母能长，提酵母质粒转大肠就长不了，之前构建出来的那个质粒提酵母质粒转大肠也不长。后来尝试了用overlap减少片段数到三个或是四个，再进行Gibson还是和之前的情况一样，求问还能通过什么方式啊，跪求 发自小木虫Android客户端 |
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