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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 做SYBRgreen1实时荧光定量pcr，空白一直有峰，而且ct一直在28左右！
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)

[求助] 做SYBRgreen1实时荧光定量pcr，空白一直有峰，而且ct一直在28左右！ 已有2人参与

做了好多次了，样品的溶解曲线挺好，但是空白的溶解曲线表现有非特异性扩增，求大神解答！

做SYBRgreen1实时荧光定量pcr，空白一直有峰，而且ct一直在28左右！


做SYBRgreen1实时荧光定量pcr，空白一直有峰，而且ct一直在28左右！-1


做SYBRgreen1实时荧光定量pcr，空白一直有峰，而且ct一直在28左右！-2


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1楼 2017-06-27 15:37:03
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
8楼: Originally posted by kofu121 at 2017-06-29 12:34:18
那个黄色的1，2代表什么意思啊，以前用的eppendorf的，ABI的才开始用

不用管，那个是提示有什么错误，通常1是扩增效率 有问题
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9楼2017-06-29 13:06:07
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)
做SYBRgreen1实时荧光定量pcr，空白一直有峰，而且ct一直在28左右！-3

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2楼2017-06-27 15:37:33
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19900905

银虫 (初入文坛)
应该是水被核酸污染了
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引物设计合成，qPCR实验
4楼2017-06-28 11:30:44
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chenllili

铜虫 (正式写手)
产物先跑个胶看看是什么情况

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5楼2017-06-28 16:22:36
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hutingting

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 双鱼座的瓶盖 at 2017-06-27 15:37:33

水被污染了，黄色三角的1和2就是该孔数据的错误类型
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10楼2017-06-29 15:30:39
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)


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3楼2017-06-28 07:02:42
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 19900905 at 2017-06-28 11:30:44
应该是水被核酸污染了

做了3遍了，一直是这样。还有，如果是水污染了，那水的溶解曲线图为什么有非特异性扩增呢？

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6楼2017-06-28 17:24:31
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)


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7楼2017-06-29 10:17:39
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kofu121

金虫 (小有名气)
那个黄色的1，2代表什么意思啊，以前用的eppendorf的，ABI的才开始用

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组织工程骨
8楼2017-06-29 12:34:18
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