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zwengmeng

新虫 (正式写手)

[求助] 阴离子交换柱已有2人参与

蛋白过阴离子交换柱的要求有哪些,我是新手请多多指教

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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

问题太笼统,涉及到缓冲液,过阴离子,缓冲也PH要大于目标蛋白PI至少1个单位。

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2楼2017-07-14 11:13:25
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zwengmeng

新虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2017-07-14 11:13:25
问题太笼统,涉及到缓冲液,过阴离子,缓冲也PH要大于目标蛋白PI至少1个单位。

谢谢!还没做

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3楼2017-07-15 11:08:33
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家


【答案】应助回帖

缓冲液的pH要适宜蛋白的活性,并且大于你目的蛋白的等电点。装柱时不要产生气泡,缓冲液和样品都做脱气处理,上样前充用平衡液充分平衡柱子,上样流速不宜过快,上样量控制在介质吸附量的50%~75%。保持平衡,上样,淋洗,洗脱时的pH保持一定。洗脱时盐浓度可以逐步提高梯度洗脱。祝你顺利。
4楼2017-08-01 12:11:36
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