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778899yqz

新虫 (初入文坛)

[求助] WB转膜问题 已有2人参与

最近在做组蛋白WB,做了几次都没有看到条带,怀疑是没有转到膜上,用PVDF,0.22,半干转湿转都做过,求相应的转膜条件,有做过组蛋白的虫友提供下,谢谢啦

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chaosyw

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-27 23:12:29
推荐一篇wb操作方面的综述吧:
https://www.labome.com/method/We ... s-and-Reagents.html
2楼2017-06-27 08:19:41
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778899yqz

新虫 (初入文坛)

3楼2017-06-27 21:47:58
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诗意喂了狗

新虫 (小有名气)

4楼2017-06-30 01:34:57
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778899yqz

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 诗意喂了狗 at 2017-06-30 01:34:57
0.45??

小蛋白用0.22的才能挂住

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5楼2017-07-11 09:23:47
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努力努力

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-04 07:45:43
比较常做组蛋白WB,首先你得确定你的组蛋白提取没有问题,如果只是WB的话,我们实验室用的是Biorad的NC膜,它对组蛋白的吸附更强,转膜条件我们用的是Biorad的电转仪器,LOW MV模式
6楼2017-08-03 21:35:23
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