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新虫 (初入文坛)

[求助] Q-pcr 已有2人参与

荧光定量的引物在跑退火温度时怎样选择最合适的退火温度

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1楼 2017-06-25 23:14:47
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stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先用PCR做温度梯度找最适条件
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坚持！
2楼2017-06-26 08:44:56
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17768543786

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stabilized at 2017-06-26 08:44:56
先用PCR做温度梯度找最适条件

最适条件的判断标准是什么啊？

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3楼2017-06-26 12:27:03
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vanchy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-27 23:11:54
引物Tm值减5作为基础退火温度，然后上下浮动3-5度做退火温度梯度扩增，产物跑电泳看条带亮度
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4楼2017-06-27 18:24:06
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17768543786

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by vanchy at 2017-06-27 18:24:06
引物Tm值减5作为基础退火温度，然后上下浮动3-5度做退火温度梯度扩增，产物跑电泳看条带亮度

谢谢！

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5楼2017-06-27 22:14:51
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