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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 请帮我看张WB图。
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婕航

新虫 (初入文坛)

[求助] 请帮我看张WB图。 已有2人参与

大家帮我看看曝出这样的结果是怎么回事，心情沉重得很，这是第二次做了，还是什么都做不出来，第一张是GAPDH，第二张是m-TOR。不胜感激！

请帮我看张WB图。


请帮我看张WB图。-1


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婕航

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1楼 2017-06-20 18:57:05
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chaosyw

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
除了技术问题个人还认为需要看下你买的抗体别人是怎么用的，不同公司的抗体质量一直是个大问题

推荐一篇labome上关于wb操作的综述吧：

https://www.labome.com/method/We ... s-and-Reagents.html

另外最好在labome上查下你购买的m-TOR抗体在别人SCI文章中的使用条件，点击下面链接第一列产品名可看到相应的SCI引用情况：
https://www.labome.com/gene/human/mTOR-antibody.html

另外labome上也有m-TOR抗体的综述：

https://www.labome.com/review/gene/human/mTOR-antibody.html
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2楼2017-06-21 12:57:19
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婕航

新虫 (初入文坛)
送红花一朵


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3楼2017-06-21 17:02:23
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婕航

新虫 (初入文坛)
谢谢！非常感谢

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4楼2017-06-21 17:02:41
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诗意喂了狗

新虫 (小有名气)
GAPDH很好显色的。操作有问题吧。。。。。

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5楼2017-06-22 00:30:37
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婕航

新虫 (初入文坛)
比如那一步呢？我GAPDH做不出来

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6楼2017-06-23 16:13:30
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婕航

新虫 (初入文坛)
转膜我按照操作说明设置了2.5hr，是不是时间太久了？因为考虑和mtor一起检测。

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7楼2017-06-23 16:17:54
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王大可可可可

新虫 (小有名气)
内参应该是很好出来的，都出不来考虑转膜有没有问题，转膜时间，温度，甲醇的浓度都会影响

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8楼2017-07-01 10:30:14
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七夕仙兰

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

转膜后用去离子水洗一下膜，做个丽春红染色看看确定蛋白转到膜上了，再往下做，如果还是不出来，换个抗体试试
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9楼2017-07-30 12:06:37
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小书生gg

新虫 (小有名气)
操作有问题

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10楼2017-08-05 13:24:46
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