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hugeneuron

新虫 (初入文坛)

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专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

全基因合成大概每个碱基3块钱。

11楼2017-06-22 06:29:21

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18388248062

新虫 (初入文坛)

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专业: 园艺学与植物营养学

引用回帖:

2楼: Originally posted by hx814102 at 2017-06-19 18:18:46
肯定模板或引物有一个出了问题

引物有问题

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12楼2017-06-22 09:56:51

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Dr.Zeara

新虫 (初入文坛)

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专业: 生物物理、生物化学与分子

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-26 23:14:30

引用回帖:

9楼: Originally posted by 18388248062 at 2017-06-21 17:32:04
我的那个基因只有在球茎才会有，其他部位没有，我去NCBI上找，找不到基因组，而且我那个基因只有目的片段，ATG…TAG。不像其他基因那样两端有多余的片段，可以设计引物，我这个我导师直接拿两尾做引物，硬是做不出 ...

找到对应的基因组序列，再向两段延伸500bp设计引物，引物自由能尽量低，以基因组模板扩增。如果还不行，就设计两对引物用巢式pcr扩

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13楼2017-06-22 10:10:43

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hzau103

新虫 (正式写手)

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是P不出吧

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14楼2017-06-22 11:00:57

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18388248062

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

13楼: Originally posted by Dr.Zeara at 2017-06-22 10:10:43
找到对应的基因组序列，再向两段延伸500bp设计引物，引物自由能尽量低，以基因组模板扩增。如果还不行，就设计两对引物用巢式pcr扩
...

好的，我试试，谢谢您

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15楼2017-06-22 14:41:47

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木子李2015

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换个酶或者换引物~

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16楼2017-06-22 15:50:32

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分子我

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做巢式引物呢？

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17楼2017-06-22 18:13:07

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lvhuajunatl

铜虫 (小有名气)

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专业: 微生物学

用pcr产物(看不见产物也没关系)做模板，再p一次。

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18楼2017-06-22 18:30:43

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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

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专业: 生物大分子结构与功能

有图吗上个图让大家看看，说不定能看出问题

现在我们能做的就是努力努力再努力

19楼2017-06-23 13:40:55

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伤何处

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

如果模板，引物都没问题的话，换个高保真酶，把之前设计的引物都一起跑一下。

对也罢，错也罢；正也罢，逆也罢；通途也好，崎岖无妨……但问，吾心坚否？若坚，纵使歧路，以铁心，贯穿而过，亦为大道！不坚，便是坦途，也难登临绝顶，观险峰

20楼2017-06-26 23:12:38

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