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加抗生素的平板，目的基因连接转化，菌长成一片，求指导 已有3人参与
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目的片段连接的T1载体，转化的dh5α，平板加的卡那抗生素，为什么培养基会长成一片？我凃板时，涂了好久，干了啊？有没有可能是目的片段插到了卡那抗性的那个基因位点?请问那个目的基因连接在载体上是随机连接上的吗，还是就是固定连接在lacz那个位置的？小白研究生，刚刚新建的实验室，就只有我一个人，啥都不懂，好慌，求大神详细指点 IMG_20170616_113803.jpg  IMG_20170616_dha5单克隆失败.jpg |
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狗屎运
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2楼2017-06-18 17:12:34
5楼2017-06-18 17:29:33
【答案】应助回帖
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吓成驴: 金币+5, 好的，我试试amp， 2017-06-21 19:39:29
吓成驴: 金币+5, 好的，我试试amp， 2017-06-21 19:39:29
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抗生素问题可能性大一些，可能抗生素失效，或者温度太高，之前有遇到过培养基温度低快凝固加抗生素也会有这种情况。此外，转化后摇菌时间是否太长？此外你用的peasy t1？这个载体有两种抗性，换amp试试。 发自小木虫Android客户端 |
20楼2017-06-21 16:22:30
小松鼠45
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-19 11:56:41
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-19 11:56:41
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抗生素要配成一千倍母液，-20度保存。用的时候，等培养基晾到不烫手的时候加进去，摇匀后倒平板。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2017-06-19 00:14:20
11楼2017-06-19 11:37:48
六维空想
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13楼2017-06-19 15:27:43
15楼2017-06-19 23:49:57
sheng_1210
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16楼2017-06-21 10:17:57
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3楼2017-06-18 17:15:42
4楼2017-06-18 17:18:48
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6楼2017-06-18 23:52:17
7楼2017-06-19 00:10:20
Unavos_李洋
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9楼2017-06-19 07:48:34
10楼2017-06-19 08:42:47
