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hqqwdm

新虫 (正式写手)

[求助] 引物3'端修饰荧光基团,还能PCR扩增出来么? 已有1人参与

我想在引物3'修饰荧光基团FAM(因实验需要),这样的话,PCR是否还能延伸扩增出来?

若如果将FAM修饰在引物中间(但靠近3'末端),是不是就不会影响PCR扩增?
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sran168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
您好:
  3‘端修饰荧光基团的话,后续就不能再扩增了,荧光基团取代了端基的羟基,相当于3端做了封闭,PCR是不能再扩增了。如果是在序列中间标记荧光基团的话,端基的羟基是保留的,是可以扩增的。
2楼2017-06-19 14:15:05
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evasong

铜虫 (小有名气)

请问您为什么一定要做3’端修饰,5’端不行吗?
3楼2017-06-20 10:22:24
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