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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因克隆
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shigm1121

新虫 (初入文坛)

[交流] 基因克隆 已有7人参与

我用相同引物从mRNA和基因组克隆到了相同的基因，但测序结果序列长度一样，中间有15处碱基不同，是什么原因？请各位大神指导一下
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1楼 2017-06-17 20:17:07
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宁文峰

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-21 22:53:14
pcr错配  是概率问题，，多做取相同的就好了。。用高保真酶，缩短循环数，优化体系，

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所追求的不在明天，而在现在以前
7楼2017-06-18 17:51:30
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普通回帖

kangaroo0513

新虫 (正式写手)
你用的taq酶吧
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2楼2017-06-17 21:20:35
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shigm1121

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2017-06-17 21:20:35
你用的taq酶吧

是的
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3楼2017-06-18 14:44:32
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shigm1121

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2017-06-17 21:20:35
你用的taq酶吧

是的，Taq酶就会出现这种问题吗？
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4楼2017-06-18 14:45:35
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大雄-静宜

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是真核还是原核啊？

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5楼2017-06-18 14:57:34
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dadiame

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的基因有内含子么？

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6楼2017-06-18 15:42:32
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shigm1121 at 2017-06-18 14:44:32
是的

换高保真酶
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8楼2017-06-18 22:55:33
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ladejueshi

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
模板不是单克隆，另外紫外照射也会引起突变。
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9楼2017-06-19 11:27:50
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shigm1121

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dadiame at 2017-06-18 15:42:32
你的基因有内含子么？

没有内含子
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10楼2017-06-20 17:06:21
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