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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 求助关于MCF-7细胞固定再用DAPI染核的问题
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莜面鱼鱼

新虫 (小有名气)

[交流] 求助关于MCF-7细胞固定再用DAPI染核的问题 已有4人参与

我的实验步骤如下，取培养细胞，移去培养基，用4%多聚甲醛固定15min,PBS洗，再加入DAPI染10min,PBS洗掉染料，由于实验室条件限制，冰箱放了一晚上，第二天早上去拍荧光，发现没有细胞了，是怎么回事？
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1楼 2017-06-15 19:56:12
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看太阳

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
markar: 金币+1, 好耐心，鼓励一下！ 2017-08-01 20:19:05
多聚甲醛是不是刚从冰箱里拿出来就用了？
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追求卓越，成功就会不期而至。
2楼2017-06-16 09:50:41
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莜面鱼鱼

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 看太阳 at 2017-06-16 09:50:41
多聚甲醛是不是刚从冰箱里拿出来就用了？

不是，甲醛在室温下放置，直接用会有影响吗
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3楼2017-06-16 15:43:00
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看太阳

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 莜面鱼鱼 at 2017-06-16 15:43:00
不是，甲醛在室温下放置，直接用会有影响吗...

直接用冷的，细胞会比较容易掉。
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追求卓越，成功就会不期而至。
4楼2017-06-16 20:56:25
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玛格丽特的

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 看太阳 at 2017-06-16 20:56:25
直接用冷的，细胞会比较容易掉。...

请问一般染核后使用多大倍数拍照啊
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5楼2017-07-14 09:30:59
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看太阳

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 玛格丽特的 at 2017-07-14 09:30:59
请问一般染核后使用多大倍数拍照啊...

取决于你想观察什么了，MCF-7细胞体积比较小，看大面积的细胞分布10X或者20X，要是要看细胞形态，同时染了actin的话，40X也可以
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追求卓越，成功就会不期而至。
6楼2017-07-14 13:07:39
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玛格丽特的

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的多聚甲醛是怎么配制的
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7楼2017-07-15 09:14:05
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丛中笑花坊

新虫 (初入文坛)
你好，你现在还在培养MCF-7吗，状态怎样，什么培养基养呢，可否交流一下
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8楼2017-08-01 17:29:46
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小白兔的愿望

捐助贵宾 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问问问题解决了吗

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9楼2019-04-26 09:26:45
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