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莜面鱼鱼

新虫 (小有名气)

[交流] 求助关于MCF-7细胞固定再用DAPI染核的问题 已有4人参与

我的实验步骤如下,取培养细胞,移去培养基,用4%多聚甲醛固定15min,PBS洗,再加入DAPI染10min,PBS洗掉染料,由于实验室条件限制,冰箱放了一晚上,第二天早上去拍荧光,发现没有细胞了,是怎么回事?
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看太阳

至尊木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
markar: 金币+1, 好耐心,鼓励一下! 2017-08-01 20:19:05
多聚甲醛是不是刚从冰箱里拿出来就用了?
追求卓越,成功就会不期而至。
2楼2017-06-16 09:50:41
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莜面鱼鱼

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 看太阳 at 2017-06-16 09:50:41
多聚甲醛是不是刚从冰箱里拿出来就用了?

不是,甲醛在室温下放置,直接用会有影响吗
3楼2017-06-16 15:43:00
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看太阳

至尊木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 莜面鱼鱼 at 2017-06-16 15:43:00
不是,甲醛在室温下放置,直接用会有影响吗...

直接用冷的,细胞会比较容易掉。
追求卓越,成功就会不期而至。
4楼2017-06-16 20:56:25
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玛格丽特的

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 看太阳 at 2017-06-16 20:56:25
直接用冷的,细胞会比较容易掉。...

请问一般染核后使用多大倍数拍照啊
5楼2017-07-14 09:30:59
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看太阳

至尊木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 玛格丽特的 at 2017-07-14 09:30:59
请问一般染核后使用多大倍数拍照啊...

取决于你想观察什么了,MCF-7细胞体积比较小,看大面积的细胞分布10X或者20X,要是要看细胞形态,同时染了actin的话,40X也可以
追求卓越,成功就会不期而至。
6楼2017-07-14 13:07:39
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玛格丽特的

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的多聚甲醛是怎么配制的
7楼2017-07-15 09:14:05
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丛中笑花坊

新虫 (初入文坛)

你好,你现在还在培养MCF-7吗,状态怎样,什么培养基养呢,可否交流一下
8楼2017-08-01 17:29:46
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小白兔的愿望

捐助贵宾 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问问问题解决了吗

发自小木虫Android客户端
9楼2019-04-26 09:26:45
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