总RNA提取效率是否会影响后面的Ct值？ - 分子生物 - 核酸提取

慷慨丈夫志,生当忠孝门,为官须做相,及第必争先.

11楼2017-06-19 10:06:47

桂桂5708

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9楼: Originally posted by sherlock0088 at 2017-06-16 10:22:26
血清加拟南芥？

拟南芥当做外参了

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12楼2017-06-19 10:07:06

桂桂5708

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10楼: Originally posted by 吕玉平 at 2017-06-16 11:03:44
会有影响的，RNA的浓度影响最后PCR反应中的模板质量，进而影响反应效率，影响CT值的因素之一就是PCR反应效率。

之前我对比过两种离心温度对提取的影响，发现温度低，总RNA的量就少，但是做到后面qPCR出来的Ct值却相差很小，不到0.5Ct的差异，这个要如何解释呢？

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13楼2017-06-19 10:08:54

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11楼: Originally posted by 桂桂5708 at 2017-06-19 10:06:47
不是RNA会是什么呢？...

看看电泳图，有可能是基因组DNA

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时间累积起来的是不容易被击溃的

14楼2017-06-19 10:44:24

匿名

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15楼2017-06-19 11:51:38

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15楼: Originally posted by yingchao0118 at 2017-06-19 11:51:38
有可能是蛋白或者DNA 你可以跑个胶看一下
...

之前我对比过两种离心温度对提取的影响，发现温度越低，总RNA的量就越少（这个是不是说明提取效率低了？），但是做到后面发现两种离心温度qPCR出来的Ct值却相差不到0.5Ct，这个要如何解释呢？

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16楼2017-06-19 14:02:15

hx814102

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17楼2017-06-19 18:27:57

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9楼: Originally posted by sherlock0088 at 2017-06-16 10:22:26
血清加拟南芥？

是的

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18楼2018-04-11 16:57:10