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gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] PCR扩不出来 已有2人参与

PCR扩出来的检测出来是这样,请问一下会是什么原因呢?以基因组为模板扩的

PCR扩不出来
2017-06-14 139 102 15 37 pcr扩增.jpg
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耳朵里的阳光

新虫 (著名写手)

marker 跑的挺好吖,怎么会这样

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2楼2017-06-15 12:18:57
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jingjing朱

新虫 (初入文坛)

maker没问题的话,应该就是DNA本身的问题了吧

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3楼2017-06-15 12:28:23
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MulanQahar

金虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-16 08:05:00
可能1.是primer 的问题! dna的长度是多少? 2. 使用的dna浓度多少? 浓度太高了,也会出现同样的结果。

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4楼2017-06-15 13:13:12
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小狼崽?

新虫 (初入文坛)

mix盐分不同,效果不同。稀释一下重跑试试

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5楼2017-06-15 14:56:58
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gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by MulanQahar at 2017-06-15 13:13:12
可能1.是primer 的问题! dna的长度是多少? 2. 使用的dna浓度多少? 浓度太高了,也会出现同样的结果。

模板DNA用了200ng,你之前做的模板多高会出现这样的情况?
6楼2017-06-15 16:53:30
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by gaohuihui at 2017-06-15 16:53:30
模板DNA用了200ng,你之前做的模板多高会出现这样的情况?...

等一下,我现在在外面,回去翻一翻我的lab book 再答复你。

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7楼2017-06-16 05:38:49
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donsod

新虫 (初入文坛)

BUFFER有问题,更换酶扩增就可以了

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8楼2017-06-16 06:39:17
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吕玉平

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议你换一下loading buffer,如果还是这种情况就是基因的问题了。跑电泳的时候重新换一下电泳液,检查一下看电压是否稳定,另外胶溶液一定要用电泳液去溶解啊。
每天的目标就是过的充实
9楼2017-06-16 09:14:58
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

虽然不是完全一样的结果,但是类似扩不出来。 最后稀释后, 成功了。 使用浓度是25ng

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10楼2017-06-17 01:30:02
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