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未雨绸缪w

新虫 (小有名气)

[求助] 冷藏的小鼠成纤维细胞的活化及传代 已有1人参与

各位大神,最近我要培养小鼠成纤维细胞,我的细胞是冷藏的,需要活化及传代,从来没有做过养过细胞,求各位大神指点,给我传授一些操作注意事项和具体的培养步骤,万分感谢。
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

冷藏,该不会保存在4度吧?

发自小木虫Android客户端
2楼2017-06-14 22:31:04
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

3楼2017-06-14 22:32:04
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未雨绸缪w

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by MulanQahar at 2017-06-14 22:31:04
冷藏,该不会保存在4度吧?

是冷冻在-80℃的,求指导
4楼2017-06-15 09:08:54
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未雨绸缪w

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by MulanQahar at 2017-06-14 22:32:04
What kind of fibroblasts?

小鼠胚胎成纤维细胞
5楼2017-06-15 09:09:21
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

6楼2017-06-15 09:09:32
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 未雨绸缪w at 2017-06-15 09:09:21
小鼠胚胎成纤维细胞...

能否告诉我英文名?

发自小木虫Android客户端
7楼2017-06-15 09:10:12
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by MulanQahar at 2017-06-15 09:10:12
能否告诉我英文名?
...

知道了,是mef
media: 20%FBS_F10 + 1%P/S+bFGF

1.先把细胞解冻
2.把解冻完的细胞,移到已加好media 的15ml tube里。混合均匀
3.离心, 1000rpm, 5min
4.去除上清夜,留下细胞沉淀物
5. 加1ml media, 混合均匀
6. 然后添加到 已加好10ml media的10 cm collagen_coated diah 里。左右上下轻轻移动,使细胞液均匀。
7. incubate at 37degree

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2017-06-15 09:22:30
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未雨绸缪w

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by MulanQahar at 2017-06-15 09:22:30
知道了,是mef
media: 20%FBS_F10 + 1%P/S+bFGF
1.先把细胞解冻
2.把解冻完的细胞,移到已加好media 的15ml tube里。混合均匀
3.离心, 1000rpm, 5min
4.去除上清夜,留下细胞沉淀物
5. 加1ml media, 混合均匀
6.  ...

非常感谢
9楼2017-06-15 20:17:34
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