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boqing

铜虫 (初入文坛)

[交流] 请教色谱柱的问题

色谱柱堵塞后,反冲对柱子的危害有多大,时间上有没限制?流速最后为多少?我用的是液相色谱柱250*4.6mm的。谢谢!
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jiangcoming

★ ★
jsys(金币+2):谢谢参与! 1-19 08:01
危害不好估计
时间没有限制,主要看你的目的,目的达到就停。有资料推荐20倍柱体积的流动相,但是一般要多冲会。
流速别太大,次数别太频繁
不知道你用的是什么柱子,目前大多柱子虽然标有流向,但是新启用时可以不按流向来。流向不能频繁变化,也就是说,偶尔反冲一下下没问题。
5楼2009-01-18 19:45:00
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clm4991275

金虫 (正式写手)

★ ★
jsys(金币+2,VIP+0):谢谢应助,常来分析版啊
如果你的柱子柱头比较实,填充比较好的话,影响很小,冲20几分钟没有关系,流速不要太高
如果你的柱头有空隙,就不能反冲,反冲了你的柱床就毁了
2楼2009-01-15 08:54:50
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lchn18

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
jsys(金币+3,VIP+0):说的不错,很有经验啊
有的柱子表明可以反冲的话就可以反冲,要是没有标明反冲的话最好不要反冲,这个得看你的柱子,如果你的柱子实在不能用的,你可以做实验反冲看看,有一定的改善,但柱效达不到以前的。
实施反冲应该注意的问题:
1.你分析的物质 主要是什么,知道这个可以选择合适的流动相;
2.选择小的流量,避免柱子塌陷;
3.有针对性加一些试剂,以便更换的洗脱。
[img=88,31]http://user.meizu.com/data/avatar/000/66/24/88_avatar_middle.jpg[/img]
4楼2009-01-15 11:02:06
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radishs

新虫 (小有名气)


wingcat(金币+1):谢谢 1-21 21:43
反冲时不要超过0.1ml流速就可以,冲100ml流动相就可以判断了。
6楼2009-01-20 22:36:17
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