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prioress

新虫 (初入文坛)

胶不平,没有弄好。在弄一次,对注意。如果还是这样找找别的原因

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21楼2017-06-15 20:34:14
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

1. buffer 的问题大。重新配制。2. gel 也注意一下。

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22楼2017-06-16 05:30:26
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donsod

新虫 (初入文坛)

胶没有煮好,还有颗粒状,增加沸腾时间,混匀

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23楼2017-06-16 06:41:29
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王查查23

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

24楼2017-06-17 13:00:22
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笨猪0503

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Marker也跑的有问题,可能胶没有做好,用0.5%的TAE做胶跑胶,电压也不要太高了,低电压跑时间长点,祝好
学习.......
25楼2017-06-17 13:10:56
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hzau103

新虫 (正式写手)

26楼2017-06-17 16:10:49
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MMCCBB

新虫 (著名写手)

观察一下胶的孔是不是斜的

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27楼2017-06-17 22:35:08
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破晓寒梅

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
19楼: Originally posted by wanglixia815 at 2017-06-15 20:33:00
我也出现过,我的是燃料的问题。。。

染料出问题是什么原因呢,最近做pcr产物酶切,酶切后电泳就是这样,但是不是酶切的没有问题,都不知道为什么?如果知道帮忙回答一下

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28楼2017-06-17 23:37:29
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萤火虫之谷

新虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

各种原因都可能。
1. 胶本身的原因。就是胶制作的不均匀 (配液时融解的不彻底,或不纯--里面有杂质)--建议重新配一块
2. 胶的制作问题,听过有人误用ddH2O 代替了缓冲液去配胶,也会这样(你自己排出一下)
3..电泳胶的浓度不适合 (大部分情况下。0.8-1%的都适用。但你没有提你的DNA时多大的)。
4. 回收的缓冲液 (TAE 反复使用,可能会引起这样的问题。你说你已经换了,可以排除)
4. 电泳槽有问题 (有的地方链接不好,造成通电不均匀)
5. 温度过高。TAE 对高温度很敏感,温度过高 或 run的时间过长, 也可能是一个原因。
6.电压: 电压过大. 一般情况下,100V/30分,适合大部分DNA片段。 但你试一下把电压降到50-60V,跑时间长一点。
7.其他


总而言之,建议重新配TAE、胶,将电压降至60以下,再试一次。

祝你顺利。
29楼2017-06-18 00:14:25
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1363026648

新虫 (初入文坛)

虽然感觉你们说的我不太懂,我们课上做过电泳实验,当时老师缓冲液加少了,没没过琼脂,最后实验结束,就是斜的。

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30楼2017-06-18 01:17:55
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