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Beryl-lxt

新虫 (初入文坛)

[求助] 做斜面培养基不凝固,不懂为啥 已有4人参与

今天分别用了伊红美蓝琼脂和营养琼脂两种培养基做斜面,然而灭菌后做斜面都不凝固,这是为啥?
我的步骤:如营养琼脂,按配比称3.3g加100ml水,加热搅拌溶解,分装到试管中后拍棉花塞,包扎后于121℃灭菌锅中灭菌20分钟,好了之后制作斜面,等了有半小时久,培养基都不凝固这是为何?

做斜面培养基不凝固,不懂为啥


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0夜狸0

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你先要煮沸溶解培养基,稍冷后(50℃)尽快分装,我以前用5mL移液枪分装的,再把分装试管塞好灭菌。
琼脂不容易溶解,如果不高压灭菌的话类似VRBA的要复沸溶解灭菌。所以你要先煮沸溶解培养基,保证琼脂均匀的分散于溶液中
14楼2017-06-14 11:52:08
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zhanglv2014

铜虫 (初入文坛)

应该是培养基浓度太稀了,你分装的时候一定要摇匀,否则容易上层稀不凝固,下层浓很容易凝固。

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填坑中,请多给点正能量,谢谢!
4楼2017-06-13 23:57:05
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270782719

新虫 (小有名气)


配制的培养基pH过于酸性,可能不凝固,测测,调整

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6楼2017-06-14 06:16:44
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stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
补充上面说的:琼脂的在水中需加热至95℃时才开始熔化,琼脂的浓度,通常是液体培养基的1~1.5%。

另外,营养琼脂哪年的,称之前晃一晃,更匀
坚持!
11楼2017-06-14 10:17:21
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bxzc12345

新虫 (小有名气)

琼脂用的时候先煮,再分,这样均匀

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13楼2017-06-14 11:29:36
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Beryl-lxt

新虫 (初入文坛)

2楼2017-06-13 22:29:24
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和光同尘1988

新虫 (正式写手)

3楼2017-06-13 23:19:32
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陆封肆闭

至尊木虫 (著名写手)

是不是你琼脂根本就没有煮化?

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5楼2017-06-14 06:03:57
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Beryl-lxt

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhanglv2014 at 2017-06-13 23:57:05
应该是培养基浓度太稀了,你分装的时候一定要摇匀,否则容易上层稀不凝固,下层浓很容易凝固。

现在用双料,溶解用吸量管分装,结果在吸量管中就结冻了,要怎么分装?量筒吗

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7楼2017-06-14 09:15:11
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Beryl-lxt

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 陆封肆闭 at 2017-06-14 06:03:57
是不是你琼脂根本就没有煮化?

常温下都能溶解,需要再煮化吗?

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8楼2017-06-14 09:18:27
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陆封肆闭

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
8楼: Originally posted by Beryl-lxt at 2017-06-14 09:18:27
常温下都能溶解,需要再煮化吗?
...

呵呵,琼脂必须煮沸,常温下是溶解不了的,只有煮沸后再冷却才会凝固,不信的话你做一百次失败一百次。

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9楼2017-06-14 09:21:33
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Beryl-lxt

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 陆封肆闭 at 2017-06-14 09:21:33
呵呵,琼脂必须煮沸,常温下是溶解不了的,只有煮沸后再冷却才会凝固,不信的话你做一百次失败一百次。
...

好的感谢

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10楼2017-06-14 09:24:57
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