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周亚群

新虫 (小有名气)

[求助] 实验 已有1人参与

用低氧处理的细胞提RNA后跑定量，用的是GADPH做内参，跟不处理的相比较，发现内参变化了，这是什么原因啊

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1楼 2017-06-13 21:32:21
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wusofa

金虫 (小有名气)

蛋白RNA相互作用研究

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个肯定要变的！

GAPDH是糖酵解通路的一个关键酶，低氧处理后整个细胞的代谢通路都会变化，所以GAPDH变化就很正常了。

我之前还比较过，我们常用的内参在药物、低氧等处理时都可能会发生变化。

建议这个实验用ACTB或者核糖体相关基因做内参会准一点。

或者直接用多个内参。

祝实验顺利，欢迎私信交流。
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2楼2017-06-14 11:19:31
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周亚群

新虫 (小有名气)
嗯嗯谢谢

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3楼2017-06-14 13:34:48
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周亚群

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wusofa at 2017-06-14 11:19:31
这个肯定要变的！

GAPDH是糖酵解通路的一个关键酶，低氧处理后整个细胞的代谢通路都会变化，所以GAPDH变化就很正常了。

我之前还比较过，我们常用的内参在药物、低氧等处理时都可能会发生变化。

建议这个实 ...

那这样的话如何分析数据呢？

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4楼2017-06-14 13:35:22
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MulanQahar

金虫 (正式写手)
建议多个内参

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5楼2017-06-15 11:02:50
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