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kfh2008

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助:关于RT-PCR引物分装和稀释的问题

我的PCR引物回来了,我按照单子后面的说明计算了引物的分子量,并且按照他提供的公式计算了配成贮存液应该加入的高压灭菌双蒸水的量,但是和他们给的量有出入,上下引物都查20ul,有谁做这方面的试验,给点建议呗,我到底是怎么配啊,也不敢完全相信自己,怕配错了浪费了材料。

谢啦


[ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 10:00 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来!
晕,引物单上有一个摩尔数
比如9nmoles
那么配成母液,就是加90ul水,配成100uM的母液
然后工作液是10uM
2楼2009-01-14 12:13:36
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kfh2008

新虫 (初入文坛)

谢谢啦,呵呵
3楼2009-01-15 11:30:31
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pigsunny

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你完全按照引物单上的说明好了,要相信人家的技术,我一般都是上海生工的引物,具体加多少都已经说的很清楚的
学习成就未来!
4楼2009-08-31 12:12:07
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zhouhuaxi

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物合成单上写的很清楚,照它的配就可以了,只是要注意他指的是每OD对应的体积数,要看自己的引物是几个OD的,相应乘以OD倍数就可以了,母液是100uM,工作液再稀释十倍即10uM.
5楼2009-08-31 16:12:49
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