9楼: Originally posted by Huobol at 2017-06-10 07:55:35
感觉够呛，看看楼主稀释更大倍数后能不能行，八成二轮引物不行，也许吧。
楼主，你第一轮条带单一，完全可以回收后连接克隆载体，送测序。不必非得做二轮PCR。看楼主一轮PCR挺不错的，就去链接T载体，送测序吧。
还 ...

8楼: Originally posted by 一叶知秋365 at 2017-06-10 07:05:09
200倍不多，再稀释一下试试吧。我们以前稀释过1000或2000。
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13楼: Originally posted by 我是是是三岁 at 2017-08-10 15:58:12
你有哪个试剂盒？我的是第一轮pcr没有条带，第二轮才有，但是杂带多，就回收了目的条带，但到后面做连接转化的时候，没有阳性克隆。求大神赐教

14楼: Originally posted by 吴秋兰 at 2017-08-12 10:13:19
我是第一轮的主要亮带大小是500多这样子，第二轮的主亮带是700多这样子
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15楼: Originally posted by 吴秋兰 at 2017-08-12 10:13:42
不知道这个情况对不对
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19楼: Originally posted by 吴秋兰 at 2017-08-12 11:16:32
因为第一轮引物是比未知序列较远的，而第二轮的是比未知序列较近的