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吴美儒

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by Huobol at 2017-06-10 07:55:35
感觉够呛,看看楼主稀释更大倍数后能不能行,八成二轮引物不行,也许吧。
楼主,你第一轮条带单一,完全可以回收后连接克隆载体,送测序。不必非得做二轮PCR。看楼主一轮PCR挺不错的,就去链接T载体,送测序吧。
还 ...

谢谢!我把二轮引物扩一轮的时候没有扩出条带,准备要克隆一轮产物了

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11楼2017-06-13 21:18:02
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吴美儒

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 一叶知秋365 at 2017-06-10 07:05:09
200倍不多,再稀释一下试试吧。我们以前稀释过1000或2000。
...

稀释了2000倍还是不行,已经放弃它了

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12楼2017-06-13 21:19:02
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我是是是三岁

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你有哪个试剂盒?我的是第一轮pcr没有条带,第二轮才有,但是杂带多,就回收了目的条带,但到后面做连接转化的时候,没有阳性克隆。求大神赐教

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13楼2017-08-10 15:58:12
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吴秋兰

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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13楼: Originally posted by 我是是是三岁 at 2017-08-10 15:58:12
你有哪个试剂盒?我的是第一轮pcr没有条带,第二轮才有,但是杂带多,就回收了目的条带,但到后面做连接转化的时候,没有阳性克隆。求大神赐教

我是第一轮的主要亮带大小是500多这样子,第二轮的主亮带是700多这样子

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14楼2017-08-12 10:13:19
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吴秋兰

新虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 吴秋兰 at 2017-08-12 10:13:19
我是第一轮的主要亮带大小是500多这样子,第二轮的主亮带是700多这样子
...

不知道这个情况对不对

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15楼2017-08-12 10:13:42
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我是是是三岁

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by 吴秋兰 at 2017-08-12 10:13:42
不知道这个情况对不对
...

有杂带吗??会弥散吗??如果是单一条带,那就是对的

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16楼2017-08-12 10:34:05
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吴秋兰

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有杂带,但杂带条带不很亮

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17楼2017-08-12 11:14:23
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吴秋兰

新虫 (小有名气)

按理说第二轮的条带大小不是应该比第一轮的小么

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18楼2017-08-12 11:15:20
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吴秋兰

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
因为第一轮引物是比未知序列较远的,而第二轮的是比未知序列较近的

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19楼2017-08-12 11:16:32
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吴秋兰

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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19楼: Originally posted by 吴秋兰 at 2017-08-12 11:16:32
因为第一轮引物是比未知序列较远的,而第二轮的是比未知序列较近的

后面的四个泳道就是第一轮步移的条带最傍边的是2000的maker
RACE



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20楼2017-08-12 11:19:10
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