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吴美儒

新虫 (小有名气)
送红花一朵
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9楼: Originally posted by Huobol at 2017-06-10 07:55:35
感觉够呛，看看楼主稀释更大倍数后能不能行，八成二轮引物不行，也许吧。
楼主，你第一轮条带单一，完全可以回收后连接克隆载体，送测序。不必非得做二轮PCR。看楼主一轮PCR挺不错的，就去链接T载体，送测序吧。
还 ...

谢谢！我把二轮引物扩一轮的时候没有扩出条带，准备要克隆一轮产物了

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11楼2017-06-13 21:18:02
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吴美儒

新虫 (小有名气)
送红花一朵
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8楼: Originally posted by 一叶知秋365 at 2017-06-10 07:05:09
200倍不多，再稀释一下试试吧。我们以前稀释过1000或2000。
...

稀释了2000倍还是不行，已经放弃它了

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12楼2017-06-13 21:19:02
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我是是是三岁

新虫 (初入文坛)
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你有哪个试剂盒？我的是第一轮pcr没有条带，第二轮才有，但是杂带多，就回收了目的条带，但到后面做连接转化的时候，没有阳性克隆。求大神赐教

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13楼2017-08-10 15:58:12
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吴秋兰

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13楼: Originally posted by 我是是是三岁 at 2017-08-10 15:58:12
你有哪个试剂盒？我的是第一轮pcr没有条带，第二轮才有，但是杂带多，就回收了目的条带，但到后面做连接转化的时候，没有阳性克隆。求大神赐教

我是第一轮的主要亮带大小是500多这样子，第二轮的主亮带是700多这样子

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14楼2017-08-12 10:13:19
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吴秋兰

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14楼: Originally posted by 吴秋兰 at 2017-08-12 10:13:19
我是第一轮的主要亮带大小是500多这样子，第二轮的主亮带是700多这样子
...

不知道这个情况对不对

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15楼2017-08-12 10:13:42
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我是是是三岁

新虫 (初入文坛)
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15楼: Originally posted by 吴秋兰 at 2017-08-12 10:13:42
不知道这个情况对不对
...

有杂带吗？？会弥散吗？？如果是单一条带，那就是对的

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16楼2017-08-12 10:34:05
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吴秋兰

新虫 (小有名气)
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有杂带，但杂带条带不很亮

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17楼2017-08-12 11:14:23
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吴秋兰

新虫 (小有名气)
按理说第二轮的条带大小不是应该比第一轮的小么

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18楼2017-08-12 11:15:20
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吴秋兰

新虫 (小有名气)
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因为第一轮引物是比未知序列较远的，而第二轮的是比未知序列较近的

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19楼2017-08-12 11:16:32
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吴秋兰

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19楼: Originally posted by 吴秋兰 at 2017-08-12 11:16:32
因为第一轮引物是比未知序列较远的，而第二轮的是比未知序列较近的

后面的四个泳道就是第一轮步移的条带最傍边的是2000的maker
RACE



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20楼2017-08-12 11:19:10
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