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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 老师您好，我在用高效液相测氨基酸，样品在色谱柱上没有保留怎么...
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1450810062

新虫 (初入文坛)

[求助] 老师您好，我在用高效液相测氨基酸，样品在色谱柱上没有保留怎么... 已有4人参与

老师您好，我在用高效液相测氨基酸，样品在色谱柱上没有保留怎么办？样品的峰在一分钟之内都出来了，我开始用的85%buffer，和15%的甲醇，峰有重叠的，后来用90%的buffer，峰都重叠在一起了，我应该怎么办呢？ @wyy080214

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1楼 2017-06-09 15:17:43
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
氨基酸通常采用柱前衍生后再进行分离，且采用氨基酸专用柱（AAA），主要是氨基酸容易成盐，极性太大，很多柱子都挂不住。你也没说用什么柱子，更没说是否衍生。真不容易帮到你。
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1450810062
2楼2017-06-09 16:10:00
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空灵天地

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测氨基酸有专门的氨基酸柱的，再者根据你提供的情况可以加大甲醇比例，降低另一个比例试试，或者试试梯度
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1450810062
真正博大的心，不但要装得下整个世界，还要能装得下创造世界的上帝！
3楼2017-06-09 16:17:12
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
使用衍生的前处理方法，或者使用氨基酸专用柱。实在不行，氨基酸自动分析仪也可以搞定。

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1450810062
4楼2017-06-09 19:51:17
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1450810062

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
4楼: Originally posted by wyy080214 at 2017-06-09 19:51:17
使用衍生的前处理方法，或者使用氨基酸专用柱。实在不行，氨基酸自动分析仪也可以搞定。

非常感谢老师，我使用的是OPA柱前衍生法，使用的柱子是SB C18，内径3微米

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5楼2017-06-10 08:23:17
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1450810062

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2017-06-09 16:10:00
氨基酸通常采用柱前衍生后再进行分离，且采用氨基酸专用柱（AAA），主要是氨基酸容易成盐，极性太大，很多柱子都挂不住。你也没说用什么柱子，更没说是否衍生。真不容易帮到你。

非常感谢，不好意思没说清楚，我使用的是OPA柱前衍生法，使用的柱子是SB C18，内径3微米的

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6楼2017-06-10 08:26:05
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1450810062

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 空灵天地 at 2017-06-09 16:17:12
测氨基酸有专门的氨基酸柱的，再者根据你提供的情况可以加大甲醇比例，降低另一个比例试试，或者试试梯度

非常感谢您，不过提高有机相比例不是应该使保留时间更短吗？我昨天手误将乙腈写成了甲醇，我使用的是OPA柱前衍生法，使用的柱子是SB C18，内径3微米

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7楼2017-06-10 08:34:22
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mayan0229

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我怀疑你AB相配反了。我的经验是A相5%的乙腈。
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8楼2017-06-10 16:40:49
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