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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 对于把三个目的片段连接有什么想法？
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littlepieyes

铜虫 (小有名气)

[求助] 对于把三个目的片段连接有什么想法？

构建异源表达载体，已经将3个目的片段用相同的双酶切位点分别导入pET28b质粒中，测序也正确。但是如何将三个连接，片段长度1251bp，1266bp和321bp，对这个不怎么明白，想请教一下有什么方法？
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1楼 2017-06-08 22:19:22
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hzau103

新虫 (正式写手)
直接用多片断链接的试剂盒来做吧 省事简单

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2楼2017-06-08 22:51:45
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hzau103

新虫 (正式写手)
或者就一步步连 而不是分别连好

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3楼2017-06-08 22:52:36
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wuyuanqing

金虫 (正式写手)
overlapPCR

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4楼2017-06-08 22:58:57
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Cuic_Qing

新虫 (初入文坛)
请问你转化的感受态是BL21吗 然后挑菌提质粒 测序吗 平板有没有做抗性筛选呢
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5楼2018-03-07 16:40:37
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)
无缝克隆

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17343151072目前在一道生物，常联系
6楼2018-03-09 23:37:41
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