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海天之恋木虫 (小有名气)
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[交流]
公司买回来的抗体、酶标抗体当初都是如何定量的了？
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本人最近刚接触ELISA这一块，涉及到抗体的酶分子标记及定量，有几个小问题一直没有搞明白，在这里想向业内的高手们请教一下，望各位施以援手，先说声：谢谢了 1.文献中抗体标记前一般都得先透析除盐，但均没有指明这个盐浓度多高时需要透析，我买回来的抗体保存液为（0.01M PBS，0.015M NaN3），这样的抗体在标记前还需要事先透析除盐吗？ 2.抗体每次操作时其实体积都很少，经过透析后，液体来回转移，这个过程中，液体应该会有一部分挂在透析袋上，最终导致抗体的部分损失，有没有其他纯化除盐的方法了？比如柱子之内的产品？ 2.公司售卖的抗体经纯化后，定量是通过什么方法了？我在实验室通过超微量分光光度计定量可以吗？ 3.酶标记的抗体该如何定量了？超微量分光光度计测量A280的值的时候，酶蛋白也会吸光啊，这个最终得到的结果肯定包含酶蛋白的含量，这种酶标记抗体的浓度到底是指单独结合的抗体浓度，还是酶标抗体这个复合物的浓度了？ |
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