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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 请教Pyes2连接目的基因的构建问题，请看图！！
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123DEE

铁虫 (小有名气)

[交流] 请教Pyes2连接目的基因的构建问题，请看图！！ 已有3人参与

本人研一初学者，近期做酵母互补，把目的基因连接到pyes2后转化到DH5a，但始终没有长出菌落，或者长出繁密的小菌落，不知道哪里出现问题了。请教大侠们！！！

请教Pyes2连接目的基因的构建问题，请看图！！
IMG_20170607_112411.jpg


请教Pyes2连接目的基因的构建问题，请看图！！-1
IMG_20170607_112528.jpg
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1楼 2017-06-07 11:42:59
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yhbletter

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
转化PUC19当个对照吧
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2楼2017-06-07 16:55:46
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123DEE

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yhbletter at 2017-06-07 16:55:46
转化PUC19当个对照吧

昨晚又重新做了一次，老师让我重新配培养基，氨苄，注意图板时的操作细节，今天早晨很紧张地打开培养箱，这次正常了，下午阳性验证我找了那么多原因，结果是自己培养基出了问题。。。不过学到了东西挺开心的。
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3楼2017-06-08 09:14:05
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小云飘~

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 123DEE at 2017-06-08 09:14:05
昨晚又重新做了一次，老师让我重新配培养基，氨苄，注意图板时的操作细节，今天早晨很紧张地打开培养箱，这次正常了，下午阳性验证我找了那么多原因，结果是自己培养基出了问题。。。不过学到了东西挺开 ...

我也遇到这个问题，你是因为培养基放太久了嘛

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4楼2017-06-08 09:20:07
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123DEE

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小云飘~ at 2017-06-08 09:20:07
我也遇到这个问题，你是因为培养基放太久了嘛
...

培养基的确放的挺久的，以后要注意了，还有抗生素也不能放太久。
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5楼2017-06-08 09:52:21
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小云飘~

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 123DEE at 2017-06-08 09:52:21
培养基的确放的挺久的，以后要注意了，还有抗生素也不能放太久。...

嗯嗯

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6楼2017-06-08 15:06:08
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涯天一方

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到过这个问题，后来通过一系列对照发现是氨苄抗性出了问题
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7楼2017-07-07 00:04:47
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