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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 用pET28表达时下游引物是否引入TAA ？
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月月大可

木虫 (著名写手)

[交流] 用pET28表达时下游引物是否引入TAA ？

用pET28表达时下游引物是否引入TAA ？

打算用pET28做表达载体，本身质粒上有终止子，我是否需要在设计下游引物的时候引入TAA ？ 我感觉即使引入也可能无法实现终止作用，估计可以使表达的蛋白断开，不然一下到终止子处终止会多表达一段序列。

各位虫友说说自己的看法。
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1楼 2009-01-13 12:15:28
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
终止密码子和终止子不是一个概念
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2楼2009-01-13 12:42:48
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jasco

木虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
如果你的蛋白C端需要连上6His的话，就不要加终止密码子，你的外源基因的也要去掉；如果你不加c-6His的话，用你外源基因的终止密码子就行了
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3楼2009-01-13 15:27:16
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
要加终止子 不加的化表达的蛋白和你的不是完全一致的 但不会影响HIS的表达 因为HIs在你基因的上游
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4楼2009-01-13 17:52:01
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月月大可

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2009-1-13 15:27:
如果你的蛋白C端需要连上6His的话，就不要加终止密码子，你的外源基因的也要去掉；如果你不加c-6His的话，用你外源基因的终止密码子就行了

多谢，我刚刚比对了酶切位点，我的His标签在上游，这样的话就可以在下游引入TAA了，让蛋白在此处中断。
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5楼2009-01-13 21:45:30
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