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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 老师好 最近在做无缝克隆把一个基因用fusion方法连接...
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无敌菜鸟
好

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11楼2017-06-06 10:06:48
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a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 拉尔维奇 at 2017-06-05 23:17:50
将    构建好的质粒导入感受态后   冰上半小时 热激90秒后   冰上放2分钟   加了lb无抗培养基 摇一个多小时的没有摇半小时长得多是不是死掉了  ，不是同一天做的，但是对比多个板   结果就是这样
...

摇的时间没多长，你应该是载体和片段没处理好吧，从新处理一下，调整比例再做

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12楼2017-06-06 21:32:22
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拉尔维奇

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by MulanQahar at 2017-06-05 23:51:32
先把pcr产物，克隆到topo_vector, 然后执行酶切，再克隆到vector。

我们没这种酶   换了酶切位点试试

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13楼2017-06-06 21:54:31
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cs冰凝

新虫 (初入文坛)
你好！你可以试试    唯地生物    可以转化毒性蛋白       感受态细胞TOP10F'！希望可以帮到你
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唯地生物，您身边的感受态专家
14楼2017-06-08 16:59:41
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
无缝克隆是不是可以直接连接表达载体？

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15楼2017-10-22 22:21:49
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修晓飞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by nadia926499 at 2017-06-06 00:01:23
我一般摩尔比会做9:1，插入片段和质粒

老师，您好，您们是怎样算的这个摩尔比？
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16楼2018-01-21 21:01:22
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