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实验室410

金虫 (正式写手)

[求助] 慢病毒浓缩时离心力为多少?我们8500g过夜离心效果并不好 已有1人参与

大家都是怎么浓缩病毒的
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像打不死的小强一样努力奋斗
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ghjzero

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
常用两种方法:氯化铯浓缩或者PEG-8000浓缩:
(1)氯化铯浓缩
1、收集的病毒上清采用12000g离心2.5h后,去上清,无菌水溶解。
2、依次加入1.5、1.4、1.3g/cm3的氯化铯各1ml,然后加入1.2的氯化铯0.5ml,无菌水0.5ml, 200000g离心22h吸取1.4层的病毒液。

(2)采用PEG法浓缩病毒颗粒的具体步骤:
1。加入4倍体积的2.5M Nacl配制的20%的(w/v)的PEG-8000,混匀后4度震荡过夜,然后12000g 4度 30分钟,然后收集沉淀即可。

另外慢病毒浓缩可以采用超速离心法或超滤,超速离心需离心力达到50000g,普通离心机无法完成;millipore公司有专门作超滤的柱子很好用,只需15分钟就能完成浓缩。
Just do it!
2楼2017-06-05 22:35:09
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实验室410

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ghjzero at 2017-06-05 22:35:09
常用两种方法:氯化铯浓缩或者PEG-8000浓缩:
(1)氯化铯浓缩
1、收集的病毒上清采用12000g离心2.5h后,去上清,无菌水溶解。
2、依次加入1.5、1.4、1.3g/cm3的氯化铯各1ml,然后加入1.2的氯化铯0.5ml,无菌水0 ...

请问有没有过夜离心这种方法?离心力为多少?我们为此专门买了转子
像打不死的小强一样努力奋斗
3楼2017-06-06 06:56:25
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