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实验室410金虫 (正式写手)
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慢病毒浓缩时离心力为多少？我们8500g过夜离心效果并不好 已有1人参与
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| 大家都是怎么浓缩病毒的 |
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ghjzero
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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常用两种方法：氯化铯浓缩或者PEG-8000浓缩： （1）氯化铯浓缩 1、收集的病毒上清采用12000g离心2.5h后，去上清，无菌水溶解。 2、依次加入1.5、1.4、1.3g/cm3的氯化铯各1ml，然后加入1.2的氯化铯0.5ml，无菌水0.5ml, 200000g离心22h吸取1.4层的病毒液。 （2）采用PEG法浓缩病毒颗粒的具体步骤： 1。加入4倍体积的2.5M Nacl配制的20%的（w/v）的PEG-8000,混匀后4度震荡过夜，然后12000g 4度 30分钟，然后收集沉淀即可。 另外慢病毒浓缩可以采用超速离心法或超滤，超速离心需离心力达到50000g，普通离心机无法完成；millipore公司有专门作超滤的柱子很好用，只需15分钟就能完成浓缩。 |
2楼2017-06-05 22:35:09
实验室410
金虫 (正式写手)
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3楼2017-06-06 06:56:25