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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » Q-PCR为啥要先提取RNA？
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YINJX

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] Q-PCR为啥要先提取RNA？ 已有4人参与

看了这个之后突然想问作者一个问题。做Q-PCR的时候一定为什么要先提取RNA再反转录成CDNA呢，而不是直接用DNA单联呢

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1楼 2017-06-05 00:44:10
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stephen.xie

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
我没做过，感觉可能是怕内含子

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2楼2017-06-05 07:58:55
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stabilized

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你要是检测DNA上基因的数量变化，那肯定得用DNA做；如果你要检测基因的表达量，那肯定得用RNA反转录的产物做。
在大部分时间内，在细胞内DNA量是一定的，DNA直接做PCR，检测不出基因表达量的变化。
提的RNA主要是rRNA，跑胶观察很直观。
反转的是mRNA，是提取出的RNA的小部分，是基因表达量的最直接反映。
写的可能有些乱，参照这些，你多看看文献。
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坚持！
3楼2017-06-05 10:54:19
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sheepshowzz

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DNA?????a, ???ǹ????, ??D??RNA???D?g??Protein??????????????.
????RNA???????????????_??????.
??RNA???????RNase???, ???????D??cDNA??????^????.
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abcdogbitepig
4楼2017-06-05 13:38:13
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sherlock0088

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
qPCR可以使用DNA做模板的。DNA做模板的qPCR一般都是绝对定量PCR，最后的结果是DNA模板的绝对含量（ug/ul）。
cDNA做模板一般用于检测基因表达量的，最后的结果是相对内参基因表达量的倍数。

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5楼2017-06-05 13:58:22
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vmp651312

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
中心法则 好好学学
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6楼2017-06-05 15:39:00
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