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YINJX

新虫 (初入文坛)

[求助] Q-PCR为啥要先提取RNA? 已有4人参与

看了这个之后突然想问作者一个问题。做Q-PCR的时候一定为什么要先提取RNA再反转录成CDNA呢,而不是直接用DNA单联呢

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stephen.xie

铁虫 (正式写手)

我没做过,感觉可能是怕内含子

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2楼2017-06-05 07:58:55
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stabilized

银虫 (小有名气)

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你要是检测DNA上基因的数量变化,那肯定得用DNA做;如果你要检测基因的表达量,那肯定得用RNA反转录的产物做。
在大部分时间内,在细胞内DNA量是一定的,DNA直接做PCR,检测不出基因表达量的变化。
提的RNA主要是rRNA,跑胶观察很直观。
反转的是mRNA,是提取出的RNA的小部分,是基因表达量的最直接反映。
写的可能有些乱,参照这些,你多看看文献。
坚持!
3楼2017-06-05 10:54:19
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sheepshowzz

铜虫 (初入文坛)

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感谢参与,应助指数 +1
DNA?????a, ???ǹ????, ??D??RNA???D?g??Protein??????????????.
????RNA???????????????_??????.
??RNA???????RNase???, ???????D??cDNA??????^????.
abcdogbitepig
4楼2017-06-05 13:38:13
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sherlock0088

金虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
qPCR可以使用DNA做模板的。DNA做模板的qPCR一般都是绝对定量PCR,最后的结果是DNA模板的绝对含量(ug/ul)。
cDNA做模板一般用于检测基因表达量的,最后的结果是相对内参基因表达量的倍数。

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5楼2017-06-05 13:58:22
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vmp651312

银虫 (小有名气)

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中心法则 好好学学
6楼2017-06-05 15:39:00
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