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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助!琼脂糖凝胶电泳DNA片段和电压的关系
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爱跑圈的懒懒

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助!琼脂糖凝胶电泳DNA片段和电压的关系 已有3人参与

做完pcr，跑凝胶电泳，片段大概七八百bp，以前电压用220v，25min，但是每次拿出来胶，都感觉，胶很热，会不会是电压太高，温度太高，对DNA电泳结果，有什么影响，适合用多大电压，，求助!

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1楼 2017-06-03 16:11:42
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bbass533

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-03 19:08:44
本帖内容被屏蔽
2楼2017-06-03 16:32:06
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木木向前冲

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-03 19:09:06
我跑小片段，90v 25-30分钟，没什么问题，电压和电流应该不太影响

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3楼2017-06-03 16:37:40
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王石头3

新虫 (初入文坛)
有影响的，电压、电流的强弱，跑的时间长短都会完成影响。比如，高电压条件下，电泳时间过长，会使样品跑太远，甚至超出了胶块。

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4楼2017-06-03 21:03:42
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sheng_1210

新虫 (小有名气)
我们用145V，跑大概15分钟就够了

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5楼2017-06-04 13:03:40
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紫风舞鸢

铜虫 (初入文坛)
我们用的是120v，电泳22分钟，电压高了，跑出来不是条状成点状了
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云中漫步
6楼2017-06-05 14:02:41
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凌绯韵

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
七八百bp的话你用什么浓度的琼脂糖胶？一般我们七八百bp的可以用百分之1.5或者百分之2的胶，150V10min足矣。百分之一浓度的琼脂糖150V电压Marker750bp条带跑12min就能出胶孔1cm，可以扫图看了。DNAbp大小和电压应该没太大影响，电压是跟着琼脂糖胶块大小走的，胶越大，电流会高，电压会低。胶块电泳时间越长越热，浓度越大电泳越容易发热。如果想条带清晰好看，可以低压慢跑，百分之一琼脂糖胶80V跑半个小时，Marker750bp条带出胶孔大概4~6cm，可以扫图看了。
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7楼2017-06-06 00:03:53
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Joyea2333

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你那个电压太高了，而且电泳液隔一段时间换一下比较好，时间长的离子浓度会增加而且里面脏的东西也会越来越多。你那个大小的片段建议你用1%的琼脂糖，90V电泳1个小时，正常的话跑的应该挺好看的。
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8楼2017-06-08 10:37:31
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