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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE问题
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lyf2258

银虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE问题

我做的SDS-PAGE为什么每次都没有条带啊？我用的样品是胰蛋白酶溶液，1.5mm的胶板，上样量为10微升，染色一个小时后脱色，但凝胶上什么痕迹都没有！
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Hello!朋友们，大家好啊
1楼 2009-01-12 15:31:51
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xiaosrr

铜虫 (小有名气)
你说的情况太简单，根本无法了解你的情况，把你的情况说说清楚把。
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2楼2009-01-12 15:58:35
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傻子

木虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论`
没有详细的说明情况不太好判断。把所有的可能因素都考虑一遍：
1） 配胶试剂问题，全部都换一遍。我曾经因为SDS的缘故，结果什么条带也没有。
2） 电泳缓冲液重新配置，试剂也换一遍。
3） 上样缓冲液？
4） 考马斯亮蓝和脱色液有没有问题？
5） 电源正负级有没搞错？

当然样品是否降解是首先要考虑的。
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1984年中国制造,长173CM,净重64kg,采用人工智能，国家免检优质产品。
3楼2009-01-12 16:21:03
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shenshanhaiguai

铁虫 (初入文坛)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论`
你们是自己配胶跑电泳吗？一般第一次做胶的时候总会因为配比问题或别的问题导致电泳失败。为了排除电泳过程中试剂和胶的缘故导致的无条带，你可以购买一些公司做好的蛋白电泳预制胶试着再做一次看看。现在很多公司出售这种预制胶的，价格也不贵。
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4楼2009-01-12 16:56:37
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lyf2258

银虫 (初入文坛)
奥，谢谢大家的帮助。我是第一次做，除了SDS,其他所有药品都是新买的！然后按照书上写的步骤自己配胶，染色剂和脱色剂也是新配的。那就有可能是SDS过期了！另外，是不加样量的多少也影响啊？我们实验室以前也没人做过这个实验。
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Hello!朋友们，大家好啊
5楼2009-01-12 19:00:01
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lyf2258

银虫 (初入文坛)
每次，指示剂溴芬兰跑的挺好的
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Hello!朋友们，大家好啊
6楼2009-01-12 19:05:05
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草菡

铁虫 (初入文坛)

评论

制胶有问题
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爱自己相爱的人。
7楼2009-01-13 09:26:52
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故乡的云

铜虫 (初入文坛)
染色有问题吧！是不是时间时间太短了！试验吗不能急，大家开始的时候都想一次成功！但是当你失败以后你会学到更多的东西！
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8楼2009-01-13 12:35:22
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