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lyf2258

银虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE问题

我做的SDS-PAGE为什么每次都没有条带啊?我用的样品是胰蛋白酶溶液,1.5mm的胶板,上样量为10微升,染色一个小时后脱色,但凝胶上什么痕迹都没有!
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xiaosrr

铜虫 (小有名气)

你说的情况太简单,根本无法了解你的情况,把你的情况说说清楚把。
2楼2009-01-12 15:58:35
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傻子

木虫 (正式写手)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论`
没有详细的说明情况不太好判断。把所有的可能因素都考虑一遍:
1) 配胶试剂问题,全部都换一遍。我曾经因为SDS的缘故,结果什么条带也没有。
2) 电泳缓冲液重新配置,试剂也换一遍。
3) 上样缓冲液?
4) 考马斯亮蓝和脱色液有没有问题?
5) 电源正负级有没搞错?

当然样品是否降解是首先要考虑的。
1984年中国制造,长173CM,净重64kg,采用人工智能,国家免检优质产品。
3楼2009-01-12 16:21:03
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shenshanhaiguai

铁虫 (初入文坛)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论`
你们是自己配胶跑电泳吗?一般第一次做胶的时候总会因为配比问题或别的问题导致电泳失败。为了排除电泳过程中试剂和胶的缘故导致的无条带,你可以购买一些公司做好的蛋白电泳预制胶试着再做一次看看。现在很多公司出售这种预制胶的,价格也不贵。
4楼2009-01-12 16:56:37
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lyf2258

银虫 (初入文坛)

奥,谢谢大家的帮助。我是第一次做,除了SDS,其他所有药品都是新买的!然后按照书上写的步骤自己配胶,染色剂和脱色剂也是新配的。那就有可能是SDS过期了!另外,是不加样量的多少也影响啊?我们实验室以前也没人做过这个实验。
Hello!朋友们,大家好啊
5楼2009-01-12 19:00:01
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lyf2258

银虫 (初入文坛)

每次,指示剂溴芬兰跑的挺好的
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6楼2009-01-12 19:05:05
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草菡

铁虫 (初入文坛)

评论

制胶有问题
爱自己相爱的人。
7楼2009-01-13 09:26:52
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故乡的云

铜虫 (初入文坛)

染色有问题吧!是不是时间时间太短了!试验吗不能急,大家开始的时候都想一次成功!但是当你失败以后你会学到更多的东西!
8楼2009-01-13 12:35:22
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