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关于微生物标准曲线实验操作和绘制的一些问题
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首先是实验的操作问题 1.怎么确定取点的时间，和代时有关系吗？我看到有很多都是隔一个小时取一个样测OD值，它们的代时都是十几分钟左右，我的微生物参考的文献doubling time 32h左右，那是不是要扩大点的间隔？ 2.关于取菌液有什么要注意的吗，我看到说要保持状态一致，取了菌液就要补充培养液之类的，有必要吗？ 3.关于曲线的点的确定，一般好像是5-6个点，够吗，不太知道测OD值要看重哪些，比如说要测到OD>1，OD值不变之类，是这样的吗？ 我近期准备测标准曲线，课题组之前没什么人做过，有点疑惑，有高手知道的话，请解答我的疑惑，谢谢谢谢谢谢！！！ 发自小木虫IOS客户端 |
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杳不知44
2楼2017-05-31 17:36:53
3楼2017-05-31 19:54:19
HKK123
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【答案】应助回帖
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小冀-: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流 2017-06-01 19:05:28
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绘制标准曲线，如果你自己首次做，我建议你开始可以做一个粗略的曲线，比如每隔3小时取一次样，测OD pH 和发酵产物等，看看你研究的菌在你配置的发酵液情况下大概多久能进入到对数期，恒定期和衰亡期，有了大概的范围之后，可以根据你的需要在指数增长期把测量的时间改为一小时或半小时等绘制更精确的指数增长，恒定期就取样长一点，再到了衰亡期再细化。这样可以节省时间工作量和得到较好的标准曲线。原始发酵液可以适当配多一点，比如200ml，每次取样测大概2ml就够了，这样也不用补充培养液，对后续结果影响也很小。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-06-01 09:26:04