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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 为什么什么我用Qiagen提取植物dna 跑胶总是弥散的
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lwq51906847

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么什么我用Qiagen提取植物dna 跑胶总是弥散的 已有1人参与

样品是经过-80冻过得OD值在1.80到1.90，可是跑胶的结果都是条带弥散 不知道哪些步骤造成了DNA的降解
求虫友帮助 新手上贴 不胜感激

跑胶图片如下
为什么什么我用Qiagen提取植物dna 跑胶总是弥散的
实验步骤如下
为什么什么我用Qiagen提取植物dna 跑胶总是弥散的-1
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1楼 2017-05-31 10:42:55
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kjyu678

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-01 07:46:36
这是有降解，试剂盒提的也都会这样！我们一般用CTAB，很完整的一条亮带

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2楼2017-05-31 11:39:49
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lwq51906847

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kjyu678 at 2017-05-31 11:39:49
这是有降解，试剂盒提的也都会这样！我们一般用CTAB，很完整的一条亮带

请问有什么方法可以减少或者避免降解呢 哪些步骤会造成降解   我之前用CTAB法提的也不好 而且太消耗时间
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3楼2017-05-31 14:25:33
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kjyu678

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lwq51906847 at 2017-05-31 14:25:33
请问有什么方法可以减少或者避免降解呢 哪些步骤会造成降解   我之前用CTAB法提的也不好 而且太消耗时间...

裂解的时间短一些会好很多，但是建议你取一个新鲜样品作对照，以确定具体原因！

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4楼2017-05-31 17:34:03
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lwq51906847

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kjyu678 at 2017-05-31 17:34:03
裂解的时间短一些会好很多，但是建议你取一个新鲜样品作对照，以确定具体原因！
...

我明天做个对照 然后按照虫友的建议试一下 希望可以得到改进、谢谢啦
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5楼2017-05-31 21:44:04
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zhuerbio

新虫 (初入文坛)
尽量减少加热时间，条带显示降解。尽量加快操作。减少可能降解的因素，如裂解时间，温度等，低温处理等等。具体细节可私信我

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6楼2017-06-01 21:49:38
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stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
裂解过度可能性最大
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坚持！
7楼2017-06-01 22:01:15
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试剂盒采购

捐助贵宾 (初入文坛)
试剂盒质量可有考虑在内

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8楼2017-06-01 22:22:47
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