| 查看: 312 | 回复: 0 | ||
[求助]
求助用酵母做基因功能鉴定遇到的问题
|
| 向大神求助：将我的目的基因连接在pYES2载体上，通过电转导入到酵母缺陷株gat1中进行功能表达，在sc-u尿嘧啶缺陷型平板上要三天才能长出白斑，继续长两三天菌斑依然很小，接种到sc-u液体培养基中菌长不起来，长四五天液体培养基依然澄清，但是菌液PCR能扩出目的条带，电镜下观察酵母比电转前小很多。接种到YPD液体培养基中菌很快生长起来，菌液PCR也能验证出目的条带，但是在之后扩培过程中发现菌液PCR扩不出目的条带了。请问有遇到这种情况的吗？扩不出目的基因是因为质粒丢了吗？该怎么避免质粒丢失呢？在sc-u液体培养基中菌长不起来，是因为我的基因不适合用酵母做表达而转录受抑制造成的吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有97人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复