| 查看: 333 | 回复: 0 | ||
[求助]
求助用酵母做基因功能鉴定遇到的问题
|
| 向大神求助：将我的目的基因连接在pYES2载体上，通过电转导入到酵母缺陷株gat1中进行功能表达，在sc-u尿嘧啶缺陷型平板上要三天才能长出白斑，继续长两三天菌斑依然很小，接种到sc-u液体培养基中菌长不起来，长四五天液体培养基依然澄清，但是菌液PCR能扩出目的条带，电镜下观察酵母比电转前小很多。接种到YPD液体培养基中菌很快生长起来，菌液PCR也能验证出目的条带，但是在之后扩培过程中发现菌液PCR扩不出目的条带了。请问有遇到这种情况的吗？扩不出目的基因是因为质粒丢了吗？该怎么避免质粒丢失呢？在sc-u液体培养基中菌长不起来，是因为我的基因不适合用酵母做表达而转录受抑制造成的吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有193人回复
-
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题
已经有0人回复
-
伊曲莫德（Etrasimod）从“肠道免疫失控”到精准靶向干预
已经有1人回复
-
西达本胺：创新HDAC抑制剂的抗肿瘤之路
已经有0人回复
-
金色抗生素单硫酸卡那霉素的物化性质、制备与前景
已经有0人回复
-
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景
已经有0人回复
-
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析
已经有0人回复
-
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析
已经有1人回复