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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 点突变PCR整个质粒无目的条带
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smile1991_26

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by jcstone1027 at 2017-05-29 22:29:43
我今天也在做这个，这个点突变扩不出来还是有可能的，我扩出来了，浓度非常低，也不能用，因为有退火温度还有引物特异性的原因。

我是在想会不会引物特异性不好

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11楼2017-05-30 01:04:45
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smile1991_26

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 伤何处 at 2017-05-29 22:38:30
一般拿质粒做模板来做PCR确实很好扩的。。。而且对引物的要求很低。我觉得你最好再确认下引物有没有错，例如扩增方向....（虽然你说引物完全没问题）...

因为师兄帮我确认过了他说引物完全正确

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12楼2017-05-30 01:05:22
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伤何处

木虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by smile1991_26 at 2017-05-30 01:05:22
因为师兄帮我确认过了他说引物完全正确
...

实验这种东西，只有自己确定了才放心。
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对也罢，错也罢；正也罢，逆也罢；通途也好，崎岖无妨……但问，吾心坚否？若坚，纵使歧路，以铁心，贯穿而过，亦为大道！不坚，便是坦途，也难登临绝顶，观险峰
13楼2017-05-30 12:06:58
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supremebo

新虫 (初入文坛)
我也在做点突变，目前也是啥条带，都没有，我想问一下你点突变成功了吗，可以请教点相关知识

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14楼2017-11-02 16:07:26
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爱MAX

木虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by supremebo at 2017-11-02 16:07:26
我也在做点突变，目前也是啥条带，都没有，我想问一下你点突变成功了吗，可以请教点相关知识

定点突变你可以试试primestar聚合酶
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15楼2017-12-13 16:51:16
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