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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 求助，SiHa宫颈癌细胞的总蛋白提取
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燕子sy

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 王大可可可可 at 2017-07-01 00:54:54
粘稠的是DNA，超声处理就好了，不超过一分钟就好，一定要在冰上操作。、.超声后离心就没有粘稠物了

我明天试试，会不会RIPA加太少了，9cm的皿，300-500微升的RIPA
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我比小强还小强，越挫越勇！
11楼2017-07-06 10:03:46
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王大可可可可

新虫 (小有名气)
我都加的200ul

发自小木虫IOS客户端
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12楼2017-07-06 16:46:39
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jqvkcqd35
13楼2017-08-19 07:59:17
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pyzrx92
14楼2017-08-20 08:22:57
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Gcking

新虫 (初入文坛)
楼主提siha细胞总蛋白有什么方法没，我最近也在做，谢谢
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15楼2018-05-22 09:11:32
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wanghm200810

铁虫 (小有名气)
美国有一种新的方法，离心管柱法，裂解之后过柱子，1分钟就可以拿到蛋白，粘稠没有关系的，不需要超声。而且是非RIPA配方，RIPA离心之后沉淀部分还是有蛋白的，只用RIPA可溶组分做下游研究不严谨，需要对不可溶组分也做研究才可以，但是不可溶组分定量不好定，上样也需要一些处理才可以。新型柱式法提取，不产生不可溶组分，一次就可以得到全部的蛋白，用这个方法得到的蛋白做下游实验，才更严谨。
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Changeyoursciencespeed！
16楼2018-05-22 14:45:29
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一朵花开的消遣

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by wanghm200810 at 2018-05-22 14:45:29
美国有一种新的方法，离心管柱法，裂解之后过柱子，1分钟就可以拿到蛋白，粘稠没有关系的，不需要超声。而且是非RIPA配方，RIPA离心之后沉淀部分还是有蛋白的，只用RIPA可溶组分做下游研究不严谨，需要对不可溶组分 ...

不需要用美国的

发自小木虫IOS客户端
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17楼2018-05-30 18:49:14
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wanghm200810

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 一朵花开的消遣 at 2018-05-30 18:49:14
不需要用美国的
...

使用进口产品，发文章不是更容易被接纳么
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Changeyoursciencespeed！
18楼2018-05-31 13:59:19
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