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mas050518

银虫 (正式写手)

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[交流] 液相中小弟一直没明白的问题

如果杂质峰出在死体积(死峰)那里,而主峰出在十几分钟,不管怎么调流动相杂质峰始终在死体积那里,只能影响到主峰出峰位置.困扰我的问题就是怎么样改变流动相可以把杂质峰的出峰位置,调离出死体积?

小弟还有个问题需要各位高手解答:缓冲盐的PH值是根据什么确定的,PH值的不同对出峰时间有什么影响,为什么采用此缓冲盐配制流动相?
因为小弟觉得这里无私奉献的高手很多,自己的问题只有在这里才能等到很好的解决.所以才发帖求告各位了. 谢谢!

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有我世界不一样

1楼 2009-01-11 18:51:22

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SHAOTM

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★ ★
wingcat(金币+2):谢谢

一点浅见
先搞明白死体积，死体积内是不可能出峰的，如果出峰那可能你的柱及柱后到检测器被污染。
我想你的应该是杂质不保留，即在死时间后立即出峰的情况。“……调离出死体积?”
首先此时你的流动相不合适，应该换用合适的流动相体系或者选择合适的pH值。

用缓冲盐可以增加流动相的表面张力，对非离子型溶质将使保留时间延后，使离子型溶质将使保留时间提前。
而缓冲盐的pH值选择取决于你的药物pKa及使其存在的离子存形式，不同的pH值下药物的存在形式不同。

这是基本的理论知识，楼主要多学习了！

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2楼2009-01-11 19:12:31

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kkroy

铜虫 (小有名气)

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★ ★
wingcat(金币+2):谢谢

在反相液相色谱分析中，流动相的PH值一般在2.5－7之间，当被分析物在反相条件下可离解，或样品的PH值在2.5－7之外时，就需要缓冲液。在反相条件下可离解的化合物一般都有氨基和羧基，他们的Pka在1－11之间，选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团以一种形式存在，离子形式或中性化合物的形式。如果样品的PH值对柱子有伤害，则缓冲溶液可使其变温和从而减小其危害

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3楼2009-01-11 19:44:51

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mas050518

银虫 (正式写手)

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谢谢,楼上两位回复.小弟确实理论方面不行,在这里学过了.感谢!

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有我世界不一样

4楼2009-01-11 20:05:59

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