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zlxnnx111

新虫 (著名写手)

[求助] 荧光定量pcr扩增不出来,目的基因是一定有的,求指导? 已有1人参与

农田土壤提取的DNA用一般的pcr扩增仪可以扩增出来,跑胶有明显的一条目的条带,但是把一般mix换成SYBR用荧光定量pcr仪扩增,就没有DNA扩增出来,这是啥原因?是因为DNA污染了吗?农田中腐殖酸或盐比较多?如果是的话如何纯化呢?求大神指导下

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yucuiyuan00

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

yanww_219: 回帖置顶 2018-06-27 08:28:02
楼主做定量PCR是更换了SYBR pre-mix,还是SYBR Green I单一加?如果是SYBR Green I单一加,要注意浓度,一般0.5×即可,浓度过高会抑制PCR反应。
保持平常心❤
3楼2017-07-04 14:07:00
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zlxnnx111

新虫 (著名写手)

自己顶一下,大神指导下啊

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2楼2017-05-26 23:13:50
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sanqianyixi

新虫 (小有名气)

请问后来楼主做定量扩增正常了么?我现在也在做土壤定量也是扩增抑制

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4楼2018-06-26 15:41:44
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zlxnnx111

新虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sanqianyixi at 2018-06-26 15:41:44
请问后来楼主做定量扩增正常了么?我现在也在做土壤定量也是扩增抑制

换了mix

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5楼2018-06-27 07:51:05
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